国家自然科学基金(81172049)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：泸州医学院西南医科大学更多>>
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- 茎-环反转录实时PCR技术分析miR-93和miR-342在乳腺癌细胞系中的表达被引量：1
- 2013年
- 目的:应用高灵敏度的特异性茎-环反转录实时PCR技术检测分析小的非编码分子miR-342和miR-93在乳腺癌细胞中的表达。方法:用miR特异性试剂盒(miRNeasy Mini Kit)提取了总RNA和miRNA,进行特异性茎-环反转录和实时PCR(stem-loop reverse transcription real-time PCR,stem-loop RT-qPCR),检测miR-342和miR-93在5种乳腺癌细胞中的表达,并进行比较分析。结果:用高灵敏度的特异性茎-环反转录实时PCR技术检测发现miR-93在T47D细胞系中呈非常高的表达,BT-549和MCF7细胞系中呈相对高表达,在MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞系低表达;而miR-342在MCF7中呈非常高的表达,MDA-MB-231,BT-549和T47D中呈相对低表达,在MDA-MB-435中表达特别低。结论:miR-93和miR-342的表达在某种程度上与乳腺癌细胞高侵袭性呈一定负相关,表明miR-93和miR-342可能是乳腺癌的抑癌基因并可能具有抑制其转移的作用,为深入分析miR-93和miR-342抑制乳腺癌转移的作用机制奠定了基础。
- 杨璐全杨曼曼刘晓燕龙燕魏春莉杨维婵傅俊江
- 关键词：实时PCR乳腺癌细胞系
- 可诱导稳定表达DLX4细胞系的构建及其表达分析被引量：2
- 2011年
- 目的:建立一种可诱导稳定表达方法,并构建DLX4细胞系。分析DLX4细胞系的表达调控。方法:将DLX4全长基因克隆入pcDNA5/FRT/TO表达载体,将其转染入宿主细胞Flp-InTMT-RExTM-293细胞系,潮霉素B筛选或者阳性克隆。采用不同剂量的DOX或者不同作用时间对pcDNA5/DLX4细胞系进行诱导表达,用Western blotting检测DLX4表达情况。结果:构建了可被Doxycline(DOX)诱导的稳定表达pcDNA5/DLX4的细胞系。0.001μg/ml的DOX即可诱导pcDNA5/DLX4细胞系的表达,0.1μg/ml DOX即可诱导该细胞系表达达到高峰;DOX对该细胞系作用1h后即可诱导该细胞系表达,对其作用16h后该细胞系表达明显增强。结论:构建了可被DOX诱导稳定表达的DLX4细胞系,不同剂量的DOX和不同作用时间对DLX4细胞系表达有不同的影响。该细胞系的建立为深入探索DLX4的功能提供了一种新的有效方法和实验材料。
- 张连美傅俊江
- 关键词：稳定细胞系蛋白质表达
- 环状RNA在肿瘤表观遗传学中的机遇及挑战
- 2020年
- 表观遗传修饰异常与肿瘤发生发展密切相关,其中非编码RNA是三种常见的表遗传修饰方式之一,而环状RNA(circular RNA,circRNA)作为一类具有闭合环状结构的非编码RNA分子,研究证实可作为miRNA的海绵起调控作用,参与肿瘤细胞增殖、分化、凋亡、侵袭、转移等多种病理生理调控.同时circRNA具有特异性表达、高度保守和高稳定性等特点,因此circRNA相关标志物可能成为肿瘤早期诊断、治疗以及预后评估的有效标志物,也为肿瘤诊疗提供了无创检测的新契机.本文主要阐述circRNA相关标志物在肿瘤中的研究进展及应用现状,并探讨其在肿瘤表观遗传学中的机遇和挑战.
- 傅俊江肖婷
- 关键词：肿瘤标志物表观遗传学
