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新基因RSTA14-44在大肠杆菌中的表达及抗体制备被引量：2: 2004年; RSTA14-44 基因是中国协和医科大分子生物学试验室在研究中获得的一个新基因,全长 1124 bp,可读编码框自 100bp^684 bp,编码 194 个氨基酸,预测其编码蛋白质分子量为 21.8 KDa。构建了包含 RSTA14-44 cDNA 全部编码框的 pET30a(+)-14 表达载体质粒,经过聚丙烯酰氨凝胶电泳纯化,免疫家兔制备了抗 RSTA14-44 抗体。Western免疫印迹分析表明,该抗体具有较高的反应性和特异性,适合用作 RSTA14-44 蛋白的进一步研究。; 袁莉刚田永强缪时英王琳芳刘英; 关键词：多克隆抗体

我国男性避孕研究的发展前景被引量：16: 2004年; 男性避孕研究长期未得到足够重视。文中综述了国内外相关研究的最新进展。重点评述了我国在用棉酚、长效睾酮和温浴睾丸作为抗精子发生所取得的成就和存在的问题,提出了“睾丸局部温浴组合低剂量棉酚”,“长效睾酮组合低剂量棉酚”和“睾丸局部温浴组合缓释长效睾酮”3种不同组合的临床研究方案和理论依据。对睾丸局部热压主要促进Ⅰ-Ⅳ期和Ⅸ-ⅩⅢ精细胞凋亡,长效睾酮主要促使Ⅶ-Ⅷ期的精细胞凋亡,而低剂量棉酚除对睾丸变态精子有作用外,主要影响附睾精子。这些组合各作用在精子发生的不同阶段,通过不同的信息通路作用于精子发生和形成的不同位点,优势互补,可大大降低单独应用时的剂量、作用时间和强度,避免各自使用时的副作用,产生最大的组合效应,符合安全、有效和可逆的理想结果。; 刘以训; 关键词：男性避孕精子发生棉酚

P16蛋白和生精细胞凋亡对热压和11酸睾酮诱导的恒河猴无精子症和少精子症中的作用被引量：6: 2002年; 探讨了P16蛋白和生精细胞凋亡在热压和 11酸睾酮诱导恒河猴无精子症和少精子症中作用间的关系。3′末端标记分析 (TUNEL)结果显示热应激和超生理剂量睾酮能够诱导生精细胞出现凋亡信号 ,它分别于处理后第 5天和第 30天达到最强。免疫组化结果显示 ,热压或TU主要诱导精原细胞和其它生精细胞以及Sertoli细胞P16的表达。P16蛋白的表达在生精细胞凋亡晚期 ,即隐睾手术第 10天或注射TU第 6 0天后迅速升高并维持高表达 ,该蛋白在生精细胞凋亡晚期可能通过抑制精原细胞的有丝分裂 ,扰乱正常的精子发生。上述结果提示 ,在热压或 11酸睾酮诱导的早期精母细胞和精子细胞的凋亡和在晚期对精原细胞有丝分裂的抑制 ,二者共同作用导致热压或TU诱导的恒河猴无精子症和少精子症。; 周新昌胡召元李因传邹如金刘以训; 关键词：P16蛋白生精细胞凋亡热压恒河猴无精子症少精子症

磷脂酶C与生殖被引量：3: 2004年; 磷脂酶C(PLC)是磷脂酰肌醇信号转导途径中一个关键酶。目前确认的哺乳类PLC共有PLC β、PLC γ、PLC δ、PLC ε和最近新发现的PLC ζ 5种亚型 ,12种同工酶。不同亚型的结构、调控和组织分布各有差异。PLC在调控信号转导通路中的特性使其在顶体反应、卵子激活中发挥了巨大的作用。本文综述了PLC家族 5种亚型的结构、调控机制及PLC在男性生殖领域的相关内容 ,包括PLC引起卵子发生Ca2 + 振荡、激活卵子、促进胚胎发育等 ,并进一步探讨了PLC在临床上可能的应用前景。; 顾爱华周作民沙家豪; 关键词：磷脂酶C 信号转导顶体反应

酵母双杂交筛选与RSA14-44相互作用的蛋白被引量：3: 2004年; 构建了包含RSA14-44cDNA的pAS2-1-14诱饵质粒,并进行了人睾丸cDNA文库的酵母双杂交筛选,获得了一条编码人20S蛋白酶体蛋白PSMB5的cDNA片段;用所获得的序列编码该蛋白3’端编码框内全部氨基酸(191个氨基酸);首次证明RSA14-44与PSMB5在酵母细胞中存在相互作用。; 袁莉刚田永强刘英缪时英王琳芳; 关键词：酵母双杂交

利用cDNA微阵列技术筛选和鉴定NYD-SP9基因被引量：4: 2002年; 运用cDNA微阵列杂交技术从人睾丸cDNA文库中筛选出人蛋白激酶基因,命名为NYD-SP9.NYD-SP9在成人睾丸中的表达水平比胚胎睾丸高10倍.Southern印迹杂交结果表明,这一基因高表达于睾丸,而低表达于卵巢.cDNA序列的蛋白质基序磷酸化位点分析也进一步提示,它有可能参与精子发生中的信号转导过程.由于这些磷酸化位点的位置彼此很接近,在这些位点之间可能存在相互作用以调控精子发生.该基因含有一个保守的穿膜功能结构域,提示经翻译后为一跨膜蛋白.以上实验结果表明,蛋白激酶基因NYD-SP9可能在男性生殖细胞分化过程中发挥一定作用.; 肖俊华尹岚岚李健民周作民朱虎沙家豪赵白鸽; 关键词：人睾丸精子发生

小鼠睾丸特异表达新基因(mtLR1)在大肠杆菌中的表达: 2006年; 根据已经克隆的mtLR1基因序列,采用RT-PCR的方法获得mtLR1基因。将所得的PCR产物插入原核表达载体pMAL-P-2x中,得重组质粒(pMAL-P-2x/mtLR1)并转化大肠杆菌(E．coli)DH5α．经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析显示,重组蛋白得到了正确表达,表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的52％,分子质量约为73 kDa。mtLR1蛋白的高效表达,为研究其生物学功能和制备单克隆抗体奠定了基础。; 聂东宋周延凯刘宇曹佐英; 关键词：大肠杆菌

特发性无精症和严重少精症患者Y染色体微缺失的分子检测被引量：12: 2001年; 目的 :研究特发性无精症和严重少精症患者与 Y染色体微缺失的关系 ,建立无精症和严重少精症患者 Y染色体微缺失的分子检测方法。方法 :应用 PCR技术对 1 0 0例无精症和严重少精症患者 (其中无精症 72例 ,严重少精症 2 8例 )进行 Y染色体 AZFa、AZFb、AZFc/DAZ、SRY的微缺失检测。结果 :1 2例患者 (1 2 % )有 AZFc的微缺失 (其中无精症 8例 ,占 1 1 .1 % ;严重少精症 4例 ,占 1 4.3% ) ,且其中 1例无精症患者为 AZFb、AZFc双重缺失 ;所有病例未发现有 AZFa的缺失 ;SRY基因 PCR扩增均为阳性。6 0例已有生育的正常男性均无 AZFa、AZFb、AZFc、SRY微缺失。结论 :Y染色体微缺失 ,特别是 AZFc/DAZ的缺失是引起无精和严重少精、造成男性不育的重要原因之一 ,在进行遗传咨询和行卵细胞质内注入精子术 (ICSI)时 ,有必要对不明原因的不育男性患者进行; 傅俊江李麓芸钟昌高李秀蓉朱文兵胡亮谭跃球范立青卢光琇; 关键词：特发性无精症少精症 Y染色体微缺失

MMP-2,-9,-14及其抑制剂TIMP-1,-2,-3在恒河猴周期黄体中的时空表达被引量：2: 2005年; 用原位杂交和免疫组织化学方法研究了基质金属蛋白酶MMP-2,-9,-14及其组织抑制因子TIMP-1,-2,-3在恒河猴周期黄体发育不同阶段的协同表达.结果显示:MMP-2mRNA及其蛋白主要表达在早中期发育黄体的内皮细胞上,在晚期黄体发生萎缩时则大量表达于黄体细胞;MMP-9,-14及其TIMP-1,-2,-3主要表达于黄体细胞;MMP-14mRNA在早期和晚期黄体中高表达,MMP-9蛋白只在晚期黄体中高表达;TIMP-3蛋白在早、中、晚三期黄体中表达均较高,但很明显晚期表达降低.结果提示:MMP/TIMP系统参与灵长类黄体发育的调控,MMP-2,-14及其TIMP-1,-3可能参与黄体的形成和功能维持,同时MMP-2,-9,-14及其TIMP-1,-2,-3在黄体萎缩期的协同表达,提示它们可能在黄体发生萎缩时发挥作用.; 陈鑫磊高洪娟高飞魏鹏胡召元刘以训; 关键词：TIMP-1 MMP-2 恒河猴周期抑制剂组织抑制因子

Analysis of gene expression patterns with cDNA microarray during late stage of spermatogenesis in mice被引量：3: 2002年; The differentiation process of round spermat-ids to spermatozoa during the late stage of spermatogenesis is called spermiogenesis. To explore spermiogenesis-related genes, cDNA microarray was used to study expression patterns of 1176 genes in pachytene spermatocytes, round spermatids and elongating spermatids of Balb/c mice. The results showed that 208 genes were detected in all the three cell types. Most of them were down-regulated from pachytene spermatocytes to round spermatids and elongating spermatids. However, up-regulation of 7 genes expression in round spermatids and 3 genes in elongating spermatids were found. Expression of 7 differentially expressed genes in cDNA arrays was further confirmed by semi-quantitative RT-PCR study. The RT-PCR results indicated that the expression of 6 genes was consistent with that in cDNA arrays, only one gene did not show differential expression by RT-PCR. These results may provide important clues for studying of expression, regulation, and function of; YU ZuorenGUAN JikuiGE YehuaMA JingGUO RuiLI SaiXUE ShepuHAN Daishu; 关键词：SPERMATOGENESIS SPERMIOGENESIS CDNA MICROARRAY

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