国家自然科学基金(30771792)
- 作品数:4 被引量:41H指数:4
- 相关作者:史贤明施春雷张春秀陈婧陆长勇更多>>
- 相关机构:上海交通大学国家工程研究中心四川大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 基于单碱基延伸标签反应的常见食源性致病菌基因芯片检测方法的建立被引量:17
- 2009年
- 针对8种常见的食源性致病菌(金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、单核细胞增生李斯特菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、志贺氏菌、肠出血性大肠杆菌O157:H7和空肠弯曲杆菌),建立了基于单碱基延伸标签反应原理的基因芯片检测方法。筛选和整合8种食源性致病菌基因组中的特异性序列和相应PCR引物,致病菌靶DNA片段被扩增和纯化作为单碱基延伸标签反应的模板,反应产物在DNA芯片上与探针进行杂交反应,然后通过扫描基片的荧光强度进行判断。实验结果表明,可采用基于单碱基延伸标签反应的基因芯片方法同时特异性检测8种食源性致病菌,基因组DNA多重检测灵敏度可达到0.1pg,以鼠伤寒沙门氏菌为单一检测对象的细菌纯培养物灵敏度可达到5×102CFU/mL。本方法可以快速灵敏地检测食源性致病菌,为食源性疾病的诊断和防治提供了一个有效的方法。
- 陆长勇施春雷张春秀陈婧史贤明
- 关键词:食源性致病菌基因芯片
- 食源性致病菌分子检测技术研究进展被引量:4
- 2010年
- 世界卫生组织提供的数据表明,全球每年有超过30亿人次患食源性疾病,其中腹泻病例就多达15亿例,有220万人因此而死亡,包括180万儿童。开展食品安全检测技术的研究,建立完善的食品安全保障体系对于确保食品供应链的安全.保障人类健康具有重要意义。
- 史贤明索标
- 关键词:分子检测技术食源性致病菌食品安全保障体系安全检测技术食品供应链食源性疾病
- 添加有扩增内标的沙门氏菌荧光定量PCR检测体系的建立与评价被引量:16
- 2011年
- 【目的】建立添加有扩增内标(IAC,Internal amplification control)的沙门氏菌EvaGreen荧光定量PCR检测体系,提高PCR检测可靠性。【方法】通过比较已有沙门氏菌属细菌的基因组序列,筛选沙门氏菌属特异检测靶点,设计特异引物;再用复合引物法构建扩增内标,优化参数,建立沙门氏菌内标PCR检测体系,利用特异性和灵敏度实验评价体系的检测性能。【结果】筛选得到的新特异靶点基因编码III型分泌系统蛋白(ssaQ)。针对该基因设计特异引物(SsaQ6),建立了添加有扩增内标的常规PCR和EvaGreen荧光定量PCR检测体系;二者对151株沙门氏菌和34株非沙门氏菌的检测符合率均达100%,对基因组DNA的检测下限达14.9拷贝/PCR和2.76拷贝/PCR;人工污染牛奶样品(初始染菌量:4-6 cfu/10 mL),増菌10 h和8 h后分别可检出沙门氏菌。【结论】本研究发掘的新靶点基因ssaQ特异性强,基于这一新靶点建立的添加有扩增内标的EvaGreen荧光定量PCR比常规内标PCR的检测限更低,重复性更好,快速方便,在12 h内即可得出检测结果,并且定量准确,有利于推进沙门氏菌PCR检测方法的标准化应用。
- 但现龙刘斌李小玲张利达施春雷周敏史贤明
- 关键词:沙门氏菌扩增内标
- 金黄色葡萄球菌毒力调控系统TCRSs和SarA被引量:5
- 2009年
- 金黄色葡萄球菌是人和动物重要的病原菌之一,为了适应寄主环境,金黄色葡萄球菌可及时调节毒力基因的表达以提高它的生存能力。金黄色葡萄球菌中主要有两类毒力基因表达的调控系统,它们分别是TCRSs(双组分调控系统)和SarA蛋白家族。TCRS在原核细菌中包含一个膜传感器和一个反应调控因子,目前已经识别出了16个这样的TCRSs;SarA蛋白家族可分为3个亚类:(1)单结构域类(SarA、SarR、SarT、SarV和SarX);(2)双结构域类(SarS、SarU和SarY);(3)MgrR同系物。这2类毒力调控系统可以同时激活多种毒力基因的表达。本文对这2类调控系统的结构和功能等方面进行综述,并对以后要解决的问题进行了展望。
- 唐俊妮史贤明曾志光王红宁胡瑜
- 关键词:金黄色葡萄球菌SARA毒力因子