国家自然科学基金(30771578)
- 作品数：2 被引量：20H指数：1
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- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学自动化与计算机技术更多>>
- 产胞外β-葡萄糖苷酶乳酸菌的筛选及其酶学性质的初步研究被引量：19
- 2009年
- 用荧光底物法从20种可利用纤维二糖的乳酸菌中筛选出10株产胞外β-葡萄糖苷酶的乳酸菌,在MRS培养基中筛选出粗酶液酶活较高的1株植物乳杆菌KLDS1.0320,进一步研究了其产酶的特点、酶学性质,结果表明,植物乳杆菌KLDS1.0320产生的胞外β-葡萄糖苷酶受底物纤维二糖的诱导,但与底物浓度有关。粗酶液酶活的最适pH为4.8,最适温度为37℃。在pH值为4.0,温度为48℃条件下仍具有酶活力。
- 万振堂杨丽杰
- 关键词：乳酸菌Β-葡萄糖苷酶纤维二糖
- 基于DNA扣除法的Real-time RT-PCR对工程乳酸菌外源基因表达的绝对定量分析被引量：1
- 2009年
- 本研究旨在利用Real-time RT-PCR对外源基因在工程乳酸菌中的表达进行定量分析,建立一种新的Real-time RT-PCR分析方法。采用玻璃珠热酚法提取工程乳酸菌总RNA,对外源目的基因的反转录(含有cDNA和DNA)样品和非反转录(仅含DNA)样品进行Real-time PCR检测,根据经典绝对定量方法并结合DNA扣除法进行分析,将得到的Ct值通过标准曲线换算为样品拷贝数,通过从反转录样品中扣除DNA样品的拷贝数的量,去除了DNA对实验结果的影响,得出最终的定量结果。采用以上方法分析工程乳酸乳球菌NZ9000中外源纤维素酶基因CBHⅡ的表达情况,对表达量较低的目的基因进行转录水平的分析,避免了RNA的损失,得到了外源基因表达的量为(1.28±0.02)×10-1 copies/cfu。这种基于DNA扣除法的Real-time RT-PCR绝对定量方法可以有效地对外源基因在工程乳酸菌中的表达进行分析。
- 史瑞刘飞霍贵成杨丽杰
- 关键词：乳酸菌REAL-TIMERT-PCR
