烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金
- 作品数：150 被引量：649H指数：12
- 相关作者：粟永萍李军马中富徐盈斌艾国平更多>>
- 相关机构：第三军医大学第三军医大学西南医院第三军医大学大坪医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教历史地理更多>>
- 大鼠表皮干细胞中α促黑素细胞激素及其受体的表达被引量：1
- 2014年
- 目的 观察体外培养的大鼠表皮十细胞（ESC）中α促黑素细胞激素（α-MSH）及黑皮质素受体1（MC1R）的表达情况. 方法 采用改良Ⅳ型胶原快速黏附法培养大鼠ESC,倒置相差显微镜下观察细胞生长形态变化,并采用免疫荧光法和流式细胞仪分别观察ESC标志物细胞角蛋白19（CK19）和整合素β1、整合素α6和CD71表达,通过免疫荧光法检测ESC中α-MSH的表达以及ESC标志物与MC1R共染的表达. 结果 （1）倒置相差显微镜下可见,接种10 min后即有细胞贴壁;培养2～3d时有小克隆形成;培养4～5d,细胞增殖明显加快,克隆逐渐增大;培养7～8d,细胞生长至70％ ～ 80％融合,呈铺路石状,折光性好.（2）免疫荧光法检测结果显示所分离的细胞均表达ESC标志物CK19和整合素β1,流式细胞仪检测结果显示所分离的细胞整合素α6阳性表达率为88.1％,CD71阳性表达率为1.3％.综上,所培养的细胞鉴定为ESC.（3）免疫荧光法检测结果显示ESC表达α-MSH,同时CK19与MC1R、整合素α6与MC1R荧光双染也呈阳性表达. 结论 体外培养的大鼠ESC可以表达α-MSH及MC1R.
- 徐苗苗邓先见姚波高成王强王永飞刘倩程勇
- 关键词：表皮干细胞
- 人TLR2和TLR4胞外区cDNA的克隆
- 2008年
- 目的从脂多糖诱导的外周血单个核细胞克隆人Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)胞外区cDNA。方法用不同浓度脂多糖在不同时间刺激单个核细胞后提取总RNA,RT-PCR方法半定量测定TLR2和TLR4的表达,应用pUCm-T载体克隆胞外区cDNA,双酶切以及DNA测序进行鉴定。结果单个核细胞在四种浓度脂多糖刺激3h、6h和12h后,TLR2和TLR4表达并不相同。15μg/mL脂多糖作用6hTLR2表达最高,10μg/mL脂多糖作用3hTLR4表达最高。经RT-PCR扩增TLR2和TLR4胞外区cDNA分别为1700bp和1900bp,T载体克隆、酶切鉴定及测序分析后证实,目的片段与GenBank中序列一致。结论脂多糖的诱导对外周血单个核细胞TLR2和TLR4表达有显著影响,并且成功克隆了胞外区cDNA。
- 孙守勋李强刘静白晓蒲晓允
- 关键词：LPS单个核细胞胞外区基因表达
- 铜绿假单胞菌噬菌体与宿主的相互作用研究进展
- 2022年
- 铜绿假单胞菌是最常见的烧伤感染创面病原菌,它能够编码多种毒力因子,具有很强的致病性,可导致预后差、病死率高。为了研究对抗铜绿假单胞菌感染的新方法,研究者们观察了其噬菌体与宿主之间广泛的相互作用。噬菌体通过多种机制影响甚至主导宿主细菌的结构、运动、代谢,促进宿主进化,也是影响宿主环境适应性和致病性的重要因素。该文分别从单细胞水平和群体水平对铜绿假单胞菌噬菌体与宿主的相互作用进行了综述。了解这些相互作用可为铜绿假单胞菌临床感染的治疗研究提供新的思路,为未来研发抗菌制剂以及指导烧伤感染治疗提供基础。
- 石茜曾茁张一鸣杨子晨彭毅志
- 关键词：铜绿假单胞菌细菌噬菌体烧伤
- 依达拉奉对创伤性脑损伤大鼠预后的改善作用被引量：3
- 2019年
- 目的探讨依达拉奉对创伤性脑损伤(TBI)大鼠预后的改善作用。方法150只健康SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组(10只)、TBI组(70只)、依达拉奉组(70只)(依达拉奉注射液剂量5.4mg·kg^-1·d^-1,每日1次腹腔注射,连续应用2周)。分别于伤后6,12,24,48,72h.1,2周共7个时相点(每个时相点10只)监测大鼠神经行为学及运动功能评分变化。处死大鼠收集血清、脑脊液标本,采用放射免疫分析法(RIA)测定血清和脑脊液B-内啡肽和促性腺激素释放激素(GnRH)含量。结果伤后6,12,24,48,72h、1,2周,依达拉奉组神经行为学及运动功能评分较TBI组升高。其中伤后48h,TBI组与依达拉奉组神经行为学评分分别为(8.2±0.9)分和(10.3±0.7)分(PvO.05),运动功能评分为(5.9±1.0)分和(6.9±1.2)分(PV0.05)。正常对照组血清和脑脊液P一内啡肽含量分别为(50.2±9.5)pg/ml和(16.2±2.8)pg/ml,GnRH含量分别为(75.2±11.2)pg/ml和(36.2±10.8)pg/ml。TBI组伤后6,12,24,48,72h、1,2周血清及脑脊液B-内啡肽和GnRH含量均明显升高;依达拉奉组血清及脑脊液P-内啡肽和GnRH含量较TBI组降低。其中伤后72h,TBI组与依达拉奉组血清P-内啡肽含量为(165.2±8.5)pg/ml和(109.5±6.3)pg/ml(P<0.05),脑脊液0-内啡肽含量为(63.3±3.1)pg/ml和(38.2±2.3)pg/ml(P<0.05);血清GnRH含量为(203.7±17.1)pg/ml和(110.4±19.2)pg/ml(P<0.05),脑脊液GnRH含量为(153.0±13.4)pg/ml和(93.2±10.5)pg/ml(P<0.05).结论在TBI急性期及恢复期连续应用依达拉奉可明显降低内啡肽和GnRH水平,有利于减轻大鼠TBI后继发性脑损伤,促进神经和功能恢复,从而改善预后。
- 张兵钱唐全张东霞李雪涛凌斌罗超王广
- 关键词：脑损伤促性腺激素释放激素依达拉奉
- 家兔吸入性损伤早期应用高氧平衡盐溶液的观察被引量：2
- 2005年
- 目的 探讨高氧平衡盐溶液在家兔吸入性损伤早期的治疗效果及其作用机制。 方法 将77只家兔随机分为4组:正常组(5只),不致伤;平衡盐溶液治疗组(24只),致伤后连续10d补充平衡盐溶液;高氧液治疗组(24只),致伤后连续10d补充高氧平衡盐溶液;对照组(24只),致伤后不治疗。致伤的3组家兔又于伤后1、2、3、5、7、10d6个时相点下观察,每时相点4只。观察各组兔呼吸情况及生存率,检测其动脉血气分析、白细胞及分类、肺湿干重比、肺组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,观察肺组织的病理改变。 结果 各致伤组兔伤后立即出现呼吸频率增快、张口呼吸、鼻翼扇动、咳嗽频繁,口、鼻腔分泌物增多,肺部可闻及干、湿性啰音撕?10d,对照组、平衡盐溶液治疗组、高氧液治疗组兔生存率分别为13. 3%、27. 8%、65. 6%。血气分析结果均显示为代谢性酸中毒。各致伤组各时相点二氧化碳分压、白细胞、中性粒细胞、肺湿干重比、肺组织MDA等指标均较正常组升高,其顺序为:对照组>平衡盐溶液治疗组>高氧液治疗组>正常组;而pH值、氧分压、SOD等指标均较正常组降低,其顺序为:对照组<平衡盐溶液治疗组<高氧液治疗组<正常组(P<0. 05).肺组织病理结果显示,家兔伤后肺体积明显增大,光镜下可见肺组织结构呈炎性改变。
- 黄立锋贾赤宇谢晓繁
- 关键词：吸入性损伤家兔正常组高氧液分泌物增多肺组织结构
- 1人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的构建并鉴定人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体。方法以pUCm-TLR4质粒为模板,运用PCR技术扩增TLR4胞外区目的基因片段,片段回收后经酶切连接穿梭质粒pAdTrack-CMV上,获得重组腺病毒质粒pAdTrack-CMV-TLR4.通过KpnⅠ和HindⅢ双酶切,测序鉴定后,将鉴定正确的质粒经PmeI酶切线性化后,转化到含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的感受态细菌BJ5183中,进行同源重组,卡那抗性筛选阳性克隆,提取质粒,用脂质体介导转染293细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR技术,Western blot等方法鉴定重组腺病毒,并进行病毒滴度测定。结果人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体构建正确,病毒滴度为3.2×109pfu/mL。结论成功构建了人TLR4胞外区基因重组腺病毒载体,为下一步实验奠定基础。
- 刘静李强孙守勋李玲柴若楠蒲晓允
- 关键词：腺病毒载体胞外区
- Phalloidin对机械牵张复合模拟缺血缺氧心肌细胞MHC mRNA表达的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨肌动蛋白细胞骨架稳定剂鬼笔槐酞 (Phalloidin)对机械牵张复合模拟缺血缺氧损伤心肌细胞肌球蛋白重链 (myosinheavychain ,MHC)mRNA表达的影响。方法 建立离体培养的心肌细胞机械牵张模型 ,并施加无糖缺氧刺激因素 ,模拟烧伤后缺血缺氧损害。采用RT PCR方法检测phalloidin对心肌细胞MHCmRNA表达的影响 ,并利用凝胶分析软件对PCR结果进行分析。结果 10 %牵张导致MHCmRNA由α型、β型表达均增加 ,且以 β型增加为主。模拟缺血缺氧时MHCmRNAα型减少 ,β型增多后下降。 10 %牵张 +模拟缺血缺氧时 ,α型、β型变化加剧 ,随刺激时间的延长转化加剧 ,12h后 ,α型、β型MHCmRNA表达均下调 (P <0 .0 1、P <0 .0 5 )。应用Phalloidin后 ,显著改善了 10 %牵张 +模拟缺血缺氧时α型向 β型的异常转化。 结论 机械牵张进一步加剧了模拟缺血缺氧对MHC基因表达由α型向 β型的异常转化及下调 。
- 李晓东黄跃生袁志强粟永萍蒋建新
- 关键词：心肌细胞缺血缺氧MHC细胞骨架
- 均匀试验设计在利多卡因缓释纳米微球制备中的应用被引量：2
- 2010年
- 目的制备利多卡因载药微球,研究制备工艺参数对微球包封率和粒径的影响。方法采用均匀试验设计法,以利多卡因(lidocaine,LID)为模型药物,以药物包封率、微球粒径为评价指标,基材及其用量为因素和水平进行U8(85)的实验,得出最佳制备工艺参数。结果制备LID-PLGA-Ns的优选条件为:主药与包材基质的质量比为1∶6、内水相的体积比为8∶2、分散剂浓度PVA为3.0%、超声乳化时间为6min、搅拌速度为2200(r/min),此时能得到包封率高、平均粒径小的载药微球。结论应用均匀试验设计建立的多元二次模型可以较好地预测药微球的基本特性。
- 赵先英刘毅敏肖湘刘海红粟永萍李明春
- 关键词：利多卡因纳米微球包封率
- 烫伤早期脑水肿家兔脑组织水通道蛋白4表达与磁共振成像结果相关性研究被引量：1
- 2011年
- 目的观察水通道蛋白4（AQP4）在严重烫伤早期合并脑水肿家兔脑组织中的表达规律以故与磁共振成像（MRI）信号变化的联系，探讨严重烫伤早期脑水肿水的跨膜转运特征、方法将35只健康新西兰大白兔按照随机数字表法分为正常对照组（5只）及烫伤组（30只），其中烫伤组家兔均造成50％TBSAⅢ度烫伤（经病理切片证实存在脑水肿）。伤后1、2、3、4、5、6h，烫伤组家兔（每时相点5只）行MRI颅脑检查并动态检测表观弥散系数（ADC）值；烫伤组家兔取额叶、颞叶及顶叶皮质．基底节区及小脑组织，采用兔疫组织化学法及RT-PCR分别检测AQP4篮门和AQP4 mRNA的表达。正常对照组家兔同上进行检测，对数据进行单因素方差分析，时AQP4蛋白与ADC值进行一元线性相关分析和Pearson线性相关分析。结果与正常对照组比较，伤后6h内烫伤组家兔MRI图像（T1加权像、T2加权像、扩散加权成像）未见明显改变，伤后4～6h烫伤组家兔脑组织各部化中ADC值均明显降低（F值为0．492～2．271，P值均小于0．05）．烫伤组家兔伤后2～6h脑组织各部位中AQP4蛋白表达趋势大体一致，均明显高于正常对照组（0．164±0．022～0．247±0．018），其中伤后311或4h达高峰（0．237±0．042～0．306±0．026），F值为2．420～11．439，P值均小于0．05。AQP4蛋白在脑组织各部位的表达均与相应ADC值变化呈显著负相关，其r值为-0．489～-0．337，P〈0．05或P〈0．01，烫伤组家兔伤后各相点脑组织各部位中AQP4 mRNA表达均明显高于正常对照组（F值为39．992～238．584，P值均小于0．05），伤后2h达高峰，且在脑组织各部位表达趋势大体一致、结论家兔严重烫伤后早期脑水肿（伤后6h以内）以细胞毒性脑水肿为主，AQP4可能在其形成过程中发挥生要作用．ADC值对于反映AQP4变化，进而无创、便捷评估脑水肿发展状况可能�
- 张艳伟黎海涛胡俊林云侯景明武文婧
- 关键词：脑水肿
- 姜黄素抑制TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞系表型转化被引量：7
- 2020年
- 目的探讨姜黄素抑制TGF-β1诱导的肾纤维化的作用及分子生物学机制。方法应用10 ng/mL TGF-β1单独或联合姜黄素(Cur)(6.25、12.5、25、50和100μmol/L)共同作用人肾小管上皮细胞系(HKCs)72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态,免疫组化检测纤维细胞特异蛋白-1(FSP-1)表达;同时,通过Western blot检测肾小管上皮细胞标志物E-cardhrin和细胞角化蛋白以及基质标志物波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原的表达变化,以及AKT/mTOR信号通路关键蛋白的表达。结果HKCs贴壁增殖,呈铺路石样外观。TGF-β1单独刺激能明显促进细胞由上皮样形态向纤维样细胞形态转化。当TGF-β1与姜黄素联合作用于HKCs时,姜黄素在12.5~50μmol/L浓度时能明显对抗TGF-β1诱导的细胞形态转变而维持HKCs细胞铺路石样外观,同时,TGF-β1能明显抑制HKCs细胞E-cardhrin和角化蛋白基因表达(P<0.05,P<0.01),而促进FSP1阳性细胞显著增加(P<0.05,P<0.01);上调波形蛋白、α-SMA和I型胶原的表达(P<0.05,P<0.01);并且,AKT/mTOR信号通路关键蛋白Akt、mTOR、p70S6K、4E-BP1和eIF4E的磷酸化水平表达也显著增加(P<0.05,P<0.01)。而姜黄素能抑制TGF-β1诱导的HKCs表型转化,同时下调TGF-β1诱导AKT/mTOR信号通路关键蛋白的磷酸化水平(P<0.05)。结论姜黄素通过抑制Akt/mTOR信号通路对抗TGF-β1诱导的上皮细胞-间质细胞转化,可能是姜黄素抗肾纤维化的关键分子机制之一。
- 陈民佳杜娟袁丹凤张蜀黄宏朱方强
- 关键词：姜黄素肾纤维化TGF-Β1
