贵州医科大学基础医学院 作品数:1,055 被引量:2,584 H指数:18 相关作者: 陈汉彬 王菲 孟立科 张姝 彭传林 更多>> 相关机构: 中国中医科学院中医药信息研究所 武汉大学人民医院 同济大学医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 贵州省科技计划项目 贵州省科学技术基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
基于Met/PI3K/Akt信号通路研究五味子甲素对人鼻咽癌细胞HONE-1增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:5 2020年 目的:研究五味子甲素对人鼻咽癌细胞HONE-1增殖、迁移和侵袭的影响及其可能机制。方法:以HONE-1细胞为研究模型,使用不同浓度[0(空白对照)、10、20、40μmol/L]的五味子甲素处理后,分别采用CCK-8试验、划痕试验和Transwell小室试验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力变化;通过计算机分子对接分析五味子甲素与酪氨酸蛋白激酶(Met)蛋白的结合能力;采用Western blotting法检测细胞中磷酸化酪氨酸蛋白激酶(p-Met)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)的相对表达量。结果:与空白对照比较,10、20、40μmol/L五味子甲素处理后细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著减弱(P<0.05);分子对接结果显示,五味子甲素能与Met蛋白的活性口袋稳定结合;Western blotting试验结果显示,与空白对照比较,10、20、40μmol/L五味子甲素处理后细胞中p-Met、p-PI3K、p-Akt、Bcl-2和N-cadherin蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05)。结论:五味子甲素可通过抑制Met/PI3K/Akt信号通路的活化来抑制HONE-1细胞的增殖、迁移和侵袭。 陈腾祥 梁黎 曾智锐 雷珊 王婧雅 孙远梅 兰金芝 薛燕关键词:五味子甲素 增殖 酪氨酸蛋白激酶 中脑腹侧被盖区SIRT1过表达对海洛因依赖小鼠学习记忆和突触结构可塑性的影响 2024年 目的探讨中脑腹侧被盖区(VTA)过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对海洛因依赖小鼠学习记忆能力和突触结构可塑性的影响。方法42只C57BL/6J小鼠分为生理盐水对照组(SCG组,n=14)、海洛因依赖组(HDG组,n=14)以及SIRT1过表达海洛因依赖组(SIRT1-OE+H组,n=14),后两组采用逐日递增注射海洛因液体建立海洛因依赖小鼠模型,SIRT1-OE+H组需先VTA注射rAAV9-rSIRT1腺相关病毒;观察小鼠条件位置偏爱(CPP)及Morris水迷宫(MWM)学习记忆行为;转染rAAV9-rSIRT121 d时,透射电镜观察VTA脑区突触超微结构,蛋白质印迹(Western blot)检测小鼠VTA脑区突触可塑性相关蛋白的表达。结果CPP试验中,与SCG相比较,HDG组小鼠在伴药箱中停留延长、CPP评分增高,SIRT1-OE+H组改变更加显著(P<0.05);MWM的定位航行试验结果显示,第4天和第5天,SIRT1-OE+H组逃避潜伏期延长(P<0.05);空间探索试验结果显示,HDG与SIRT1-OE+H组小鼠穿越平台次数增多(P<0.05),但目标象限停留时间比率、目标象限路程比率差异无统计学意义(P>0.05);透射电镜结果显示,HDG和SIRT1-OE+H组突触后膜致密物增厚,突触界面曲率增大;Western blot结果显示SIRT1-OE+H组中突触素(Syn)、突触后致密区蛋白95(PSD95)、生长相关蛋白43(Gap43)表达较SCG明显增多(P<0.05)。结论SIRT1参与了海洛因依赖过程,其机制可能是SIRT1过表达增强了突触可塑性,促进了海洛因引起的奖赏效应,但SIRT1对空间学习记忆能力的影响不显著。 马旋 谭雨维 刘美君 郑欣雅 赵传睿 尹丹 王茜 李豪 夏白娟关键词:中脑腹侧被盖区 突触可塑性 海洛因 基于整合生物标志物响应指数分析磷石膏渗滤液对斑马鱼鳃和肠道组织的毒性效应 2024年 目的探讨以整合生物标志物响应(IBR)指数分析磷(P)化工区P石膏渗滤液对斑马鱼鳃和肠道组织的毒性作用。方法600尾斑马鱼随机均分为对照(充分曝气的自来水)组和不同浓度(0.052%、0.104%及0.208%)P石膏渗滤液(采自某磷化工区P石膏渗滤池)组,暴露28 d,分别于第7、14、21及28天分批麻醉处死,取鳃和肠道组织制备组织匀浆液,检测各组斑马鱼鳃和肠道组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性及丙二醛(MDA)的含量,计算IBR指数综合评价不同浓度P石膏渗滤液对斑马鱼的毒性效应。结果暴露第7天时,与对照组比较,0.052%组斑马鱼鳃组织SOD和GPx活性增加且肠道组织GPx活性下降(P<0.05),0.104%组斑马鱼鳃组织SOD和GPx活性及MDA含量增加且肠道组织SOD和GPx活性下降(P<0.05),0.208%组斑马鱼鳃组织SOD、CAT、POD活性及MDA含量增加且肠道组织SOD和POD活性下降、CAT活性和MDA含量增加(P<0.05);暴露第14天时,与对照组比较,0.052%组斑马鱼鳃组织GPx活性增加(P<0.05),0.104%组斑马鱼鳃组织CAT、POD、GPx活性增加且肠道组织SOD、CAT、POD、GPx活性及MDA含量增加(P<0.05),0.208%组斑马鱼鳃组织SOD活性下降和GPx活性、MDA含量增加且肠道组织CAT活性增加(P<0.05);暴露第21天时,与对照组比较,0.052%组斑马鱼鳃组织POD活性下降且肠道SOD、CAT活性下降(P<0.05),0.104%组斑马鱼鳃组织SOD活性和MDA含量增加且肠道组织CAT活性下降(P<0.05),0.208%组斑马鱼肠道组织CAT、POD活性下降(P<0.05);暴露第28天时与对照组比较,0.052%组斑马鱼鳃组织CAT活性增加且肠道SOD、POD及GPx活性增加(P<0.05),0.104%斑马鱼鳃组织SOD活性增加且肠道组织SOD、CAT活性增加(P<0.05),0.208%组斑马鱼鳃组织SOD、CAT、GPx活性增加且肠道组织CAT、GPx活性增加(P<0.05);0.052%、0.104%及0.208%组斑马鱼鳃组织IBR指数均于暴露第14天达到最低,0.052%� 刘龙 郭子毓 王敏 潘莎 王涛关键词:磷石膏 肠道 基于网络药理学探讨防风调控铁死亡干预砷暴露所致小鼠肝肾损伤的作用机制 2025年 目的基于网络药理学方法,探讨防风在砷暴露引起的小鼠肝肾损伤中的作用机制,特别是其对铁死亡的调控效应。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(traditional chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)、中药综合数据库(traditional Chinese medicine integrated database,TCMID)、中药百科全书数据库(encyclopedia of traditional chinese medicine,ETCM)数据库收集防风中18味中药有效成分及预测靶点;通过GeneCards数据库获取肝损伤、肾损伤及砷中毒靶点,并在铁死亡数据库(ferroptosis database,FerrDb)中获取铁死亡靶点;确定交集靶点后,构建蛋白质-蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction,PPI),进行基因本体论(gene ontology,GO)功能注释,京都基因与基因百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析;为验证上述预测,将36只昆明小鼠随机分为正常对照组(Control)、亚砷酸钠(Sodium arsenite,NaAsO_(2))模型组、防风低剂量(NaAsO^(2+)L)组、防风中剂量(NaAsO^(2+)M)组、防风高剂量(NaAsO^(2+)H)组以及二巯基丙磺酸钠(sodium dimercaptopropanesulfonate,DMPS)阳性药(NaAsO^(2+)D)组,共6组;通过对应药物灌胃30 d后,HE染色观察小鼠肝、肾病理变化,Western blot检测肝、肾组织中炎症因子[核因子E2相关因子2(anti-nuclear factor erythroid 2-related factor 2 antibody,Nrf2)、白细胞介素-1β(anti-interleukin-1 beta antibody,IL-1β)、IL-18]、铁死亡相关蛋白[谷胱甘肽过氧化物酶4(anti-Glutathione peroxidase 4 antibody,GPX4)、溶质载体家族7成员11(anti-solute carrier family 7 member 11 antibody,SLC7A11)、环氧合酶2(anti-cyclooxygenase-2 antibody,COX2)]以及PI3K/AKT通路蛋白[磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(anti-phosphorylated Phosphoinositide 3-kinase antibody,p-PI3K)、磷脂酰肌醇3-激酶(anti-phosphoinositide 3-kinase antibody,PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(anti-phospho-AKT antibody,p-AKT)、蛋白激酶B(anti-AKT antibody,AKT)]� 顾丹 何恒琳 夏梅 黄瑾莹 何光辉 王新宇 陈彦余 陈洪焦点 刘晓红 潘际刚关键词:防风 PI3K/AKT 幽门螺杆菌临床标本的最佳运送条件及最适培养基的实验研究 目的:探索幽门螺杆菌临床标本的最佳运送条件和最适培养基.方法:将实验菌株加入小牛血清、牛奶运送液,分别置不同温度及气体环境6h后接种于哥伦比亚血琼脂微需氧培养;将20例临床标本分别接种于MH和哥伦比亚血琼脂微需氧培养5天... 王琼 杨杰 潘科 黄亚琴 陈峥宏 王菲 綦廷娜白纹伊蚊雌蚊唾液腺匀浆血小板聚集抑制与抗凝血活性的探讨 被引量:1 2018年 本文旨在探讨白纹伊蚊Aedes albopictus唾液腺匀浆粗蛋白(salivary gland extract,SGE)血小板聚集抑制和抗凝血活性,为后续单个唾液蛋白在蚊虫吸血中的功能研究奠定基础。采用比浊法检测低、中、高浓度SGE在不同血小板聚集激活剂作用下对人血小板聚集活性的影响,手工法检测不同浓度SGE对人全血部分凝血活酶时间,凝血酶原时间,凝血酶时间的影响。结果显示,低浓度SGE对Ⅰ型胶原诱导的血小板聚集有显著抑制作用,随着浓度升高具有明显的量效关系,最高抑制率可达90. 36%;高浓度SGE对凝血酶诱导的血小板聚集具有显著抑制作用。SGE对ADP诱导的血小板聚集无明显抑制作用。SGE对人血浆APTT、PT、TT均有延迟效应,1. 25 ng/m L SGE即对TT有显著延迟效应。研究结果表明,白纹伊蚊SGE不仅对胶原诱导的血小板聚集有明显的抑制作用,而且可作用于血液级联凝集全过程。 李世琪 闫妍 翟慧 王政艳 程金芝 吴家红关键词:白纹伊蚊 血小板聚集 抗凝血 斑马鱼结核性脑膜炎模型的制备及其用于抗结核性脑膜炎药物评价的研究 2025年 目的制备两种不同的斑马鱼-海分枝杆菌(Mycobacterium marinum,M.m)结核性脑膜炎模型,评价抗结核药物穿过血脑屏障清除斑马鱼脑部细菌的能力,评估模型应用于抗结脑药物评价的可行性。方法以斑马鱼幼鱼为观察对象,显微注射M.m至斑马鱼幼鱼总主静脉与后脑,制备全身性与局限性感染的结核性脑膜炎模型;通过高内涵显微镜拍摄斑马鱼体内M.m的动态变化,同时利用抗酸染色、HE染色评估两种模型的制备效果;体外测试异烟肼(isoniazid,INH)、利福平(rifampicin,RIF)对M.m菌株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC);用不同剂量的INH、RIF以总主静脉注射或浸泡给药的方式处理脑部局部感染的斑马鱼幼鱼,通过检测药物作用后斑马鱼脑部菌载量,评价药物穿过血脑屏障对脑部M.m生长的作用。结果经总主静脉注射,M.m可随血液循环生长扩散至斑马鱼幼鱼脑部,可模拟肺外(mycobacterium tuberculosis,Mtb)随血液循环系统进入脑部的感染过程;后脑注射M.m可在斑马鱼脑部引发类上皮细胞增生、炎症细胞聚集等免疫反应,并且在感染后4 d,M.m仍局限在斑马鱼脑部,此种感染方式适用于研究药物入脑的效果;INH对抑制脑部M.m生长的效果优于RIF(P<0.05),提示INH能更好的穿透血脑屏障发挥功效。结论通过总主静脉、后脑注射M.m至斑马鱼幼鱼可成功制备斑马鱼结核性脑膜炎模型,该模型可用于评估抗结核药物通过血脑屏障的能力。 刘茂颖 牛良飞 郭文娟 郭晓奎 宋曙 晏博 陈峥宏关键词:斑马鱼 异烟肼 贵州2起麻疹暴发疫情病毒分离株基因特征分析 被引量:2 2016年 目的对2014年11月—2015年3月贵州发生的2起麻疹暴发疫情病毒分离株进行基因特征分析。方法采集暴发麻疹病例咽拭子标本,经Vero/SLAM细胞分离培养,从阳性培养物中提取病毒RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增麻疹病毒核蛋白(N)基因,对扩增产物进行测序与分析。结果2起麻疹暴发共分离到11株麻疹病毒野毒株,均为H1基因型中的H1a基因亚型;进化树分析有2个明显的分支。11株暴发麻疹病毒与H1a基因亚型参考株Chin9322的核苷酸和氨基酸遗传距离差异分别为1.1%~1.6%和0.7%~3.4%。推导出氨基酸序列与参考株Chin9322及近年来贵州流行株比较,结果显示有6株在主要位点[47(G-S)、82(S-G)、122(R-K)]发生变异;2株在位点98(P-L)发生变异。结论H1a基因亚型麻疹病毒是引起2014—2015年贵州省2起麻疹疫情的主要病原,也是贵州省以及全国本土流行的优势基因亚型;且多个不同的H1a基因亚型病毒传播链在贵州省持续流行。本研究为贵州省麻疹的控制和消除提供了一定的基础资料。 唐小敏 张丽 叶绪芳 任刚 左丽关键词:麻疹病毒 基因型 埃及伊蚊丝氨酸蛋白酶抑制剂23的基因克隆表达与多克隆抗体制备 2017年 埃及伊蚊serpin23(丝氨酸蛋白抑制剂23)在雌蚊唾液腺特异高表达,是蚊虫唾液组分的主要蛋白之一。本文设计特异性引物序列,采用RT-PCR技术扩增获得埃及伊蚊广东电白株serpin23成熟肽序列,构建重组表达质粒pET-28a(+)-serpin23并测序验证。经IPTG诱导表达、KCl染色、切胶纯化获取了目的蛋白;制备了小鼠特异性抗serpin23蛋白多克隆抗体。结果显示:获得serpin23成熟肽序列,全长1 197bp,编码399个氨基酸。等电点pI为6.13,具有serpin结构域和一个功能未知的FAINT结构域。pET-28a(+)-serpin23重组质粒可表达了大小约为47 kDa、以包涵体表达为主的融合蛋白。Western Blot结果证明serpin23重组蛋白可以与抗-His标签和抗-serpin23抗体发生免疫反应,约47 kDa处产生特异性条带。本研究成功获得了埃及伊蚊广东电白株serpin23重组表达蛋白和抗serpin23多克隆抗体,为后续功能研究奠定基础。 翟慧 王政艳 吕清巧 程金芝 李世琪 杨茜 商正玲 吴家红关键词:埃及伊蚊 克隆表达 WESTERNBLOT 巨噬细胞与单核细胞的细胞骨架调控相关的差异基因表达 被引量:2 2019年 目的:分析单核细胞(Mo)向巨噬细胞(Mφ)分化的过程中,细胞骨架的调控相关基因及信号通路的表达变化。方法:CEO数据库获得Mo和Mφ的芯片数据,经RStudio软件分析获得差异表达基因(DEGenes),利用STRING在线工具对DEGenes构建蛋白质相互作用网络(PPI),Cytoscap软件筛选出DEGenes的核心模块;对筛选出的DEGenes的核心模块进行GO和KEGG分析。结果:Mφ相对于Mo的差异表达基因共476个,主要涉及的信号通路包括NOD样受体信号通路和吞噬体信号通路,这些通路中CCL18、CXCL8和C3等相关基因与细胞骨架的调控密切相关。结论:Mo向Mφ分化过程中细胞骨架调控相关基因的表达发生了显著改变。 宋咏刚 胡文慧 余鹏 石玉玲 石玉玲 胡祖权 赵雪 胡祖权关键词:巨噬细胞 单核细胞 细胞骨架 生物信息学 基因芯片