阮文科
- 作品数：43 被引量：45H指数：4
- 供职机构：北京农学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学文化科学更多>>
- 变异型PEDV北京分离株ELISA检测法的建立被引量：2
- 2021年
- 【目的】为基层养殖场的批量样本检测以及猪流行性腹泻病(PED)的快速诊断提供更为有效的方法。【方法】利用原核表达系统表达了猪流行性腹泻病毒(PEDV)S1部分基因序列,建立用于检测变异型PEDV北京分离株的间接酶联免疫吸附测定方法。【结果】经试验检测表明,该ELISA检测方法敏感性较高、重复性良好、特异性显著、有良好的稳定性和较长的保存期,且临床样本检测与市场上试剂盒比较符合率较高。【结论】此方法可以作为临床免疫检测变异株PEDV的方法,为PEDV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗的开发提供了依据。
- 夏婷郭娇娇廖晨星阮文科
- 关键词：流行性腹泻原核表达蛋白
- 一株粪肠球菌及其广谱抑菌作用
- 本发明公开了一株粪肠球菌及其广谱抑菌作用的应用。本发明提供了一株粪肠球菌（Enterococcus faecalis）E15-CUI，其保藏号为CGMCC NO.6130。本发明还提供了所述的粪肠球菌（Enterococ...
- 崔德凤张永红刘凤华阮文科李焕荣
- 乙型脑炎病毒非结构蛋白的表达及与hnRNP K的相互作用
- 2024年
- 【目的】为探明JEV病毒复制与宿主蛋白的关系。【方法】首先构建非结构蛋白质粒,然后将构建成功的非结构蛋白的质粒转染至Vero细胞中,24 h在荧光显微镜下观察蛋白表达情况,再分别与pCMV-MYC-hnRNP K质粒同时转染至Vero细胞中,培养24 h,收取细胞蛋白样,进行Co-IP试验相关步骤,用Western-blot实验进行结果呈现,得出试验结果。【结果】构建的非结构蛋白质粒在Vero细胞中可以表达,通过与表达hnRNP K蛋白的质粒共转染,通过Co-IP试验经Western-blot结果分析能够得出JEV的NS1与hnRNP K之间存在相互作用,JEV的NS2a、NS3、NS5与宿主hnRNP K之间不存在相互作用。【结论】JEV的NS1蛋白与宿主蛋白hnRNP K存在相互作用,为JEV非结构蛋白的研究进一步拓宽了思路,同时为JEV病毒在宿主细胞中的生命活动周期的研究提供了基础,为深入研究JEV病毒复制提供了新方向。
- 郝悦徐胜奎阮文科
- 关键词：乙型脑炎非结构蛋白免疫共沉淀
- 夏秋季猪场中主要致病微生物及其控制被引量：1
- 2011年
- 我国是世界养猪第一大国,猪病频发各类新老猪病是困扰我国生猪生产的主要因素。某些急性传染性猪病的暴发会对我国生猪产业造成严重的打击,如2006年的高致病性蓝耳病(猪繁殖与呼吸综合征)的出现及猪瘟的暴发,曾造成国内近半数猪的死亡或淘汰。而某些慢性传染病的存在则可能造成累积的危害,如仔猪生长不良、饲料转化率降低、妊娠母猪流产,或影响猪生产性能,其危害也不容小觑。夏秋季是猪病多发的季节,除了猪场中常年发生的一些传染性较强的病毒类疾病外,细菌类疾病在此季节的发病率也会直线上升。因此,夏秋季节是控制猪病的一个关键时期,在此时期对猪场中微生物控制成功与否,决定了本年度生猪产业能否健康发展。下面就这一时期在猪场中应该注意防控的一些致病微生物予以论述。
- 阮文科
- 关键词：微生物控制夏秋季节致病微生物猪场慢性传染病
- Eimeria tenlla和E. acervulina对凋亡诱导抑制的研究被引量：5
- 2017年
- 为了研究鸡艾美耳属球虫不同种在入侵细胞早期对凋亡诱导抑制的差异,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenlla)和堆型艾美耳球虫(E.acervulina)纯化的裂殖子入侵马-达氏牛肾细胞(MDBK细胞)1.5 h后,对被入侵的细胞计数并计算入侵率;加入含6%乙醇的完全培养基对细胞诱导凋亡3 h,检测细胞凋亡率。结果表明,E.tenlla裂殖子和E.acervulina裂殖子入侵率为21%和43%;凋亡诱导组的凋亡率是36.98%;柔嫩艾美耳球虫凋亡诱导组的凋亡率是25.77%;堆型艾美耳球虫凋亡诱导组的凋亡率是28.92%。柔嫩艾美耳球虫凋亡诱导组与凋亡诱导组之间差异极显著(P<0.01);堆型艾美耳球虫凋亡诱导组与凋亡诱导组之间差异极显著(P<0.01)。柔嫩艾美耳球虫凋亡诱导组与堆型艾美耳球虫凋亡诱导组之间差异显著(P<0.05)。结果提示,E.acervulina裂殖子入侵细胞并起到明显的抑制细胞凋亡作用,在入侵早期也许有类似于E.tenlla裂殖子抑制凋亡的机制;与E.tenlla裂殖子的抑制率相比略低,这可能与它的个体大小、致病能力有关。
- 赵晨璐王黎霞宋丽聪郑新枫张建军阮文科安健
- 关键词：球虫艾美耳属裂殖子凋亡抑制
- 猪源产细菌素肠球菌的分离鉴定被引量：3
- 2013年
- 为了分离鉴定产细菌素类乳酸菌,采用双层琼脂扩散法,对从健康猪胃肠道分离到的56株细菌进行筛选,获得对大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌均有抑制作用的12株细菌,在排除酸、过氧化氢等因素作用后仍具有较强抑菌活性,表明发酵液中还有其他抑菌活性物质的存在,用蛋白酶处理上清液后抑菌效价明显下降,表明这种抑菌物质具有蛋白质性质,能够被蛋白酶降解,初步确定为一种细菌素类物质。具有抑菌活性的菌株采用形态学和生理生化特征观察并结合16SrDNA序列分析、遗传进化树比较,结果显示,分离菌为革兰阳性,圆形或卵圆形的球菌,生理生化及糖发酵符合肠球菌属的特征;16SrDNA序列与GenBank中屎肠球菌FJ749740、粪肠球菌FJ749378同源性为99.3%～100%。综合判定E2、E3、E4、E5、E6、E7、E8、E10和E11 9株分离菌为粪肠球菌,E1、E9和E12 3株分离菌为屎肠球菌。细菌素作为潜在的抑菌物质,与其产生菌一起在平衡肠道菌群中具有重要意义。
- 张永红阮文科李焕荣杨瑞崔德凤
- 关键词：肠球菌细菌素生理生化RDNA序列分析
- 大肠杆菌热敏感肠毒素的检测与制备被引量：2
- 2004年
- 为探索猪源大肠杆菌热敏感肠毒素的简易检测方法和纯化方法,拟采用兔回肠结扎试验、兔皮肤蓝斑试验和平板免疫溶血试验比较检测热敏感肠毒素的方法。初步试验表明:平板免疫溶血试验能够快速灵敏地检测出热敏感肠毒素,并具有很强的特异性,比肠结扎试验灵敏度高,而且简便易行;采用SephadexG 100纯化热敏感肠毒素LT并采用SDS PAGE电泳检测蛋白纯度,表明该方法可以除去杂蛋白,肠毒素蛋白分子量为12
- 张永红崔德凤阮文科李焕荣马允英路苹于同泉
- 关键词：纯化蛋白外毒素
- 鸡肿瘤坏死因子-α原核表达及生物活性鉴定
- 2011年
- 为研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)免疫功能,从鸡盲肠扁桃体克隆TNF-α的CDs保守区全序列,与pGEX-6p-1载体连接构建原核表达质粒,转化大肠杆菌M109,IPTG诱导蛋白表达,经包涵体洗涤、溶解、复性、亲和柱层析获得纯化的融合蛋白,经Western-blot鉴定为鸡TNF-α融合蛋白;用CEF/VSV法和MTT法检测表明,该融合蛋白的抗病毒活性为1.2×26 U/mg,在5-6稀释度下能显著促进淋巴细胞增殖。
- 王黎霞王彩霞张建军阮文科徐赓安健
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α原核表达生物活性
- 禽冠状病毒组织嗜性和固有免疫应答差异研究被引量：1
- 2021年
- 鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis,IB)一直是危害世界养禽业的最重要的疫病之一。IBV变异频繁,导致出现多种不同致病性毒株,不同致病性IBV的出现可能与其感染后免疫系统的激活有关。对IBV组织嗜性和感染后的免疫机制的研究对疫病防控具有重要意义。本研究为了探究IBV不同毒株组织嗜性和固有免疫应答之间的关系。将不同IBV毒株接种原代细胞、鸡胚、SPF鸡,进行各器官的组织嗜性鉴定,应用荧光定量的方法测定TLR3、TLR7、MAVS、MDA5、IFN-β和IFN-γ等细胞因子在SPF鸡的不同组织器官包括气管、肾、胃、肺、脾和法氏囊中mRNA的表达差异。结果表明,除H52为已知疫苗毒株外,AH毒株对泌尿系统致病性强,TM毒株对消化系统有致病性。感染实验后显示,在气管中,AH感染组MDA5的mRNA表达显著下调,TM组IFN-β和IFN-γ的mRNA表达显著性上调,H52组MAVS与IFN-β表达上调;在肺脏中,AH组TLR3、TLR7、IFN-β和IFN-γ显著性上调,在TM组能看到MDA5和IFN-γ表达显著升高,H52组的TLR3、TLR7、MDA5、IFN-β和IFN-γ上调;在肾中,AH组和TM组IFNβ和TLR7表达下调,H52组TLR7、MAVS、IFN-β和IFN-γ表达上调;在腺胃中,AH组TLR7、MAVS、MDA5、IFN-β和IFN-γ表达上调,TM株IFN-γ表达上调,H52组TLR7表达显著性下调,MAVS、IFN-β和IFN-γ表达上调;在脾脏中,AH组MAVS表达上调,TM组TLR3、TLR7和MDA5表达显著性上调。H52组TLR7和IFN-γ的表达也显著提高;在法氏囊中,AH组各因子表达无显著性差异,TM组TLR7、MDA5和IFN-γ表达上调,H52组中TLR3、TLR7、MAVS、MDA5、IFN-β和IFN-γ表达均显著上调。不同组织嗜性的IBV毒株在各组织器官中各细胞因子表达量不同,不同组织嗜性毒株在固有免疫应答上存在差异且与免疫分子表达水平有相关性。本实验为不同IBV毒株感染机制、疫苗开发、病原与细胞相互作用的研究应用奠定理论基础。
- 李雪妍徐双朱瑾彦阮文科
- 关键词：组织嗜性固有免疫应答细胞因子
- 一种微生物饲料添加剂及其制备方法
- 本发明公开了一种微生物饲料添加剂及其制备方法。本发明提供了一株粪肠球菌，其保藏号为CGMCC NO.6130和一株凝结芽孢杆菌，其保藏号为CGMCC NO.6151。本发明的复合微生物饲料添加剂组成包括：粪肠球菌30-3...
- 崔德凤张永红李焕荣阮文科
