曲勤凤 作品数:70 被引量:290 H指数:9 供职机构: 上海市质量监督检验技术研究院 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 国家自然科学基金 上海市质量技术监督局科技项目 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 医药卫生 生物学 化学工程 更多>>
可可粉中常见谷物成分的PCR检测技术研究 被引量:1 2012年 实验利用PCR方法检测可能掺入可可粉中的谷物成分。通过比较6种可可粉DNA的提取方法,建立了一种可靠、快速的方法,提出的DNA能够用于后续PCR反应。同时设计并验证了谷物通用引物的特异性和通用性,包括水稻、小麦、玉米、高粱米、荞麦、燕麦等常见谷物可通过1次PCR扩增筛选出来。模拟可可粉样品中谷物成分检出限达到0.1%。使用该方法检测了市场上购买的14个样品,均未检出常见谷物成分。为可可粉中可能添加的外源性物种检测提供了快速有效检测的方法和思路。 顾文佳 段文锋 葛宇 李兆阶 王丁林 张文珠 曲勤凤关键词:可可粉 PCR检测 微生物法对小麦胚芽中维生素B_6的测定 被引量:4 2015年 比较国标法中微生物法和商品化维生素B_6检测试剂盒法对小麦胚芽中维生素B_6测定的差异性。运用国标法和试剂盒法对小麦胚芽中维生素B_6进行测定。国标法测定标准曲线在1~8 ng范围内具有良好的线性关系(R^2=0.995 6),试剂盒法在2~12μg范围内线性关系良好(R^2=0.996 1)。通过两种方法对6份小麦胚芽中维生素B_6含量进行检测,国标法检测最大RSD为4.26%,试剂盒法最大RSD为6.38%。对于天然样品小麦胚芽中维生素B_6的测定,国标法相对于试剂盒法有更好的适用性,但操作过程较为繁杂;而试剂盒法的检测周期短,适合于强化维生素B_6的样品测定。 王志伟 徐琼 陈欣钦 曲勤凤关键词:维生素B6 微生物法 小麦胚芽 基于微滴式数字PCR的饮料中嗜酸乳杆菌定量检测 被引量:5 2020年 基于微滴式数字PCR技术(droplet digital polymerase chain reaction,ddPCR)建立饮料中嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus strains)的检测方法。以嗜酸乳杆菌NCFM的SPIDR区域的重复序列设计并合成的引物,对其进行条件优化、特异性检测、优化反应体系,并对体系的灵敏度、重复性、抗干扰能力进行验证,最后对市售的实际样品进行检测。结果表明该方法的特异性很好;方法的灵敏度达到了0.25 pg/μL;重复性的标准偏差在2.34%~6.1%之间;在抗干扰检测中,实验组与对照组结果一致性好,提示该方法抗干扰能力较好;对市售的11批次样品进行检测,标记含有嗜酸乳杆菌的样品中均检出嗜酸乳杆菌且含量为1.6×10^3~2.3×10^6copies/g。研究建立的ddPCR方法可用于饮料中的嗜酸乳杆菌的快速和精确定量。 刘洋 张娜娜 窦同海 俞漪 徐琼 曲勤凤 赵渝 杨捷琳 朱春梅关键词:嗜酸乳杆菌 婴幼儿配方乳粉中双歧杆菌的分子鉴定及标签相符性研究 被引量:5 2015年 完成了对我国市场常见益生菌婴幼儿配方乳粉标签标识情况的调查;利用16Sr RNA技术建立了基于双歧杆菌基因组序列的分子鉴定方法,对市场常见的19例益生菌乳粉中分离得到的28株双歧杆菌进行菌株分子鉴定和标签相符性分析,为该类产品的安全监管提供技术参考和建议。 段文锋 刘洋 陈雯雯 张清平 俞漪 曲勤凤 赵渝关键词:RNA 双歧杆菌 分子鉴定 标签 鱼糜制品中主料含量的实时荧光定量PCR法测定 被引量:7 2011年 应用实时荧光定量PCR技术对鱼糜制品中主料成分进行了鉴定分析。该方法通过一个外源基因和内参校正基因对鱼糜制品标准品建立标准曲线,利用标准曲线计算出主料成分的质量百分比。方法线性程度良好(R2>0.985),回收率符合方法学要求,从而证明了此方法在实验室条件下的可行性。 曲勤凤 黄青山 段文锋 胡雪莲 张清平关键词:实时荧光定量PCR 鱼糜制品 PCR法检测食品中大肠杆菌O157:H7 被引量:25 2010年 对大肠杆菌O157:H7型菌株的各毒力基因及基因组中的特异序列进行了设计和比对,确定292bp的检测引物。常规定性PCR和实时定量PCR证明该引物特异性强。模拟样品的前增菌实验结果表明本方法可以在原样品活菌浓度约2.0CFU/mL时通过16h增菌后检测出来,总的检测时间可以控制在24h内。本实验建立的PCR方法可用于食品中大肠杆菌O157:H7的快速测定。 巢强国 杨学明 葛宇 熊薇 曲勤凤 王瑞元关键词:大肠杆菌O157:H7 食源性致病菌 PCR TaqMan实时荧光PCR法定量检测生肉中猪源性成分的建立 被引量:14 2016年 目的:建立基于Taq Man实时荧光PCR技术的猪源性成分的定量检测方法。方法:选择朊蛋白基因为猪特异性基因和线粒体12S r RNA为内参基因,使用△Ct法进行相对定量。通过对其他种类的肉源DNA进行扩增,以验证方法的特异性;对含有1%猪肉的混合肉DNA进行系列稀释,确定检出限,并对自制模拟掺假肉进行猪源性掺假的测定,对该方法进行验证。结果:所用的引物具有较好的特异性,当模板浓度为50 ng/μL时对猪源性扩增的平均Ct值为22.73,而其他种类的肉源进行扩增时均未能检测到扩增信号,检出限为0.25%(w/w);检测结果在猪肉含量为1%~100%(w/w)范围内具有良好的线性关系,相关系数R2=0.9955。内部验证结果表明,根据标准曲线得到的盲样检测结果同样品真实含量具有较高的一致性,变异系数在0.1270%~1.2044%之间。结论:所建立的Taq Man实时定量PCR法可用于生肉中猪源性成分的定量检测。 徐琼 张奕南 顾文佳 张清平 胡雪莲 赵燕 曲勤凤关键词:实时荧光PCR 微生物法测定婴幼儿乳粉中烟酸含量 被引量:5 2019年 目的建立微生物法测定婴幼儿乳粉中烟酸含量的分析方法。方法通过比较不同浓度标准曲线对同一标准物质样品的测定结果,确定准确最优的线性浓度范围,并在该标准范围内进行重复性及加标回收实验。结果当烟酸标曲线性浓度范围为5.0~50.0ng时,线性关系良好(r^2=0.996)。该方法的相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为1.71%(n=6),平均回收率为94.4%。结论该方法稳定准确,适合用于测定婴幼儿乳粉中烟酸的含量。 顾晨荣 徐琼 庞贝妮 王志伟 曲勤凤关键词:烟酸 微生物法 一种婴儿配方乳粉中克罗诺杆菌属的CRISPR One Pot检测方法及其试剂盒 本发明公开了一种婴儿配方乳粉中克罗诺杆菌属的CRISPR One Pot检测方法,包括:婴儿配方乳粉中克罗诺杆菌属增菌培养;取增菌液提取DNA;以此DNA为模板加入CRISPR One Pot反应体系,同时进行LAMP扩... 刘洋 张懿翔 张清平 李林显 张奕南 王越 杨捷琳 曲勤凤 翁史昱 刘天益 王金 赵国屏复合调味料食品安全标准现状分析和标准制定的建议 被引量:8 2012年 文章主要描述了国内外复合调味料产品的安全标准状况,比较和分析了国内外标准中主要技术指标设立情况,并提出了制定复合调味料食品安全标准的建议。 段文锋 林琳 曲勤凤关键词:复合调味料 调味料 指示菌