张友明
- 作品数:46 被引量:74H指数:5
- 供职机构:湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 多杀菌素基因重组的工程菌菌剂
- 本发明涉及多杀菌素基因重组的工程菌。发明采用Red/ET同源重组技术对多杀菌素(Spinosad)全基因进行修饰及插入功能性组件,同时与Bt4.0718菌株的crylAc基因重组,分别在发光杆菌(Photorhabdus...
- 夏立秋张友明丁学知孙运军莫湘涛黄璠罗朝辉王海龙
- 文献传递
- 复合微生物菌剂在长毛对虾标苗养殖过程中的应用研究被引量:1
- 2020年
- 复合微生物菌剂是一类有效的生物防治剂,在农业和水产养殖业中都起着重要的作用。本研究以长毛对虾(Penaeus penicillatus)标苗为试验对象,共分为4个组别,组1投喂无微生物菌剂添加的饲料作为对照组,组2、组3和组4为试验组,投喂有复合微生物菌剂添加的饲料,其中微生物菌剂分别占饲料质量的1.0%、1.5%和2.0%。每个组进行33 d的养殖,测定养殖期间对虾生长性能、养殖水池底泥和水质相关性质,探讨微生物菌剂对对虾生长的影响。结果显示:试验前对照组与3个试验组的体重无显著差异(P>0.050),试验后各试验组的体重均高于对照组(P<0.050),其中组4体重达(0.60±0.03)g,表明微生物菌剂的使用促进了对虾标苗的生长;水体弧菌个数在试验不同时间之间有显著差异(P=0.000),对照组呈上升趋势,第30天时未添加微生物菌剂的对照组弧菌数目最高,表明微生物菌剂能控制水体有害菌的生长;水体中的溶解氧(DO)含量在养殖不同时间之间均具有显著差异(F=191.959,P=0.000),NH4-N、NO2-N和NO3-N的含量均是如此,F值分别为250.633、659.806和1937.649,P值均为0.000,从养殖第10天开始,试验组DO含量均高于对照组,而试验组的NH4-N、NO2-N和NO3-N含量均低于对照组。综上所述,复合微生物菌剂对对虾有明显地促生长作用,并且还能在一定程度上净化养殖环境。
- 谢芝玲徐佳莹潘登刘峰陈燕杨焕胜印遇龙印遇龙张友明张友明
- 关键词:复合微生物菌剂对虾养殖
- 通过激光共聚焦显微镜分析苏云金芽胞杆菌中DNA与原毒素的分布特征
- 研究表明苏云金芽胞杆菌的伴胞晶体中包含有DNA片段。为了探究苏云金芽胞杆菌在不同生长时期细胞内DNA与原毒素的分布情况,我们构建了cry1Ac-gfp 融合基因并在无晶体突变株中表达,采用DNA特异荧光染料和绿色荧光蛋白...
- 胡泉芳王静芳付祖姣莫湘涛丁学知夏立秋张友明孙运军
- 三种淡水鱼类在中国南北两个地区的肠道菌群差异比较被引量:6
- 2020年
- 山东省德州市禹城市和湖南省长沙市望城区分别属于我国北方和南方地区,环境和气候差异明显。本试验以禹城市和望城区两地的草鱼(Ctenopharyngodon idella)、鲫鱼(Carassius auratus)和鲤鱼(Cyprinus carpio)为研究对象,对肠道中的菌群进行16s rRNA V4高变区扩增,基于IonS5 TM XL测序平台进行测序,并对相关数据进行分析。结果表明,在门水平上鲫鱼、鲤鱼、草鱼的肠道优势菌主要为变形菌门(Proteobacteria)、梭杆菌门(Fusobacteria)、硬壁菌门(Firmicutes),拟杆菌门(Bacteroidetes),各组中这四种菌门所占比之和均在80%以上;基于Bray-Curtis距离值的秩次进行组间差异显著性检验,山东草鱼组和湖南草鱼组比较中组间差异大于组内差异(R=0.307,P<0.05),且线性判别分析显示湖南草鱼组的特征性菌群为弧菌属,而山东草鱼组的为梭菌纲,推测特征性菌群差异与环境的影响有关;有害菌种的统计分析表明,湖南鲫鱼组和鲤鱼组的嗜水气单胞菌属相对丰度明显高于对应的山东鲫鱼组和鲤鱼组,山东草鱼组和鲤鱼组的弧菌属相对丰度高于对应的湖南草鱼组和鲤鱼组,可能受外界环境的影响,不同地区抵御外来有害细菌的能力也不一样。本研究对两地的淡水鱼类肠道微生物群落结构进行了比较和分析,为进一步的鱼类发育研究奠定基础。
- 徐佳莹李演谢芝玲陈汉娜潘登刘峰陈燕梁淑淑丁学知夏立秋张友明涂强
- 关键词:鲫鱼鲤鱼草鱼肠道微生物
- 苦瓜MAP30蛋白的原核表达及其生物活性研究被引量:4
- 2014年
- 以天然苦瓜基因组为模板PCR扩增去前导肽后成熟的MAP30蛋白基因,克隆至可诱导表达载体pET28a中。将含MAP30基因的表达载体pET28a-MAP30转化至E.coli Rostta(DE3)中并通过IPTG诱导表达。经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白杂交(Western blot)以及液相色谱-质谱(LC-MS)对表达的重组MAP30蛋白进行鉴定,并通过镍柱亲和层析纯化。将pUC19质粒与不同浓度的纯化后的重组MAP30蛋白孵育,分析其切割DNA的活性。同时将纯化后的重组MAP30蛋白体外作用于人乳腺癌细胞(MCF-7),采用MTT、AO/PI双染等方法进行抗肿瘤活性分析。实验结果表明纯化后的蛋白经质谱鉴定和Western blot分析,目的蛋白成功地与His-tag融合表达。首次发现大肠杆菌异源表达的重组MAP30蛋白同天然蛋白一样可以切割超螺旋DNA活性。MTT、AO/PI双染结果证实重组MAP30体外可诱导MCF-7细胞发生凋亡。通过基因工程技术大量制备MAP30蛋白,进一步研究其体外生物学活性,为以后的临床应用奠定基础。
- 邱华丽穰杰丁学知胡胜标张友明朱道奇夏立秋
- 关键词:核糖体失活蛋白基因工程DNA切割
- 三种组成型启动子调控的鼠李糖脂基因在防御假单胞菌中的异源表达及活性研究被引量:1
- 2019年
- 本研究利用Red/ETDNA重组技术对实验室已有的含鼠李糖基转移酶基因RhlAB的分泌表达载体pBBR1-genta-RhlAB进行修饰,将3种不同强度组成型启动子(Papra、Ptac和PrhaB)成功替换了RhlAB基因在铜绿假单胞菌中的原始启动子,成功获得了表达载体pBBR1-genta-Papra-RhlAB,pBBR1-kan-Ptac-RhlAB和pBBR1-kan-PrhaB-RhlAB,并将这些表达载体分别在防御假单胞菌Pf-5中异源表达,通过LB培养基发酵42h后,Pf-5/pBBR1-genta-RhlAB的鼠李糖脂产量为17.56mg/L,而Pf-5/pBBR1-genta-Papra-RhlAB,Pf-5/pBBR1-kan-Ptac-RhlAB和Pf-5/pBBR1-kan-PrhaB-RhlAB分别是11.135mg/L,441.135mg/L,557.764mg/L,启动子优化后产量分别是原始启动子的0.63,25.12和31.76倍。对发酵产物进行高效液相色谱-质谱联用技术分析,共检出相对含量变化的4类质核比不同的鼠李糖脂同系物。并通过实时荧光定量PCR检测RhlAB基因的表达量,发现启动子替换为Ptac和PrhaB后RhlAB基因表达量分别是原始启动子的2.16和2.77倍。本研究初步实现了RhlAB基因在Pf-5中的表达,发现组成型启动子Ptac和PrhaB比RhlAB的原始启动子表达效率更高,可为异源合成鼠李糖脂提供重要参考。
- 谢芝玲陈汉娜钟林徐佳莹李演潘登刘峰丁学知夏立秋张友明张友明
- 关键词:鼠李糖脂
- 噬菌体在防控鱼类细菌性病害中的作用机制及其应用
- 2023年
- 鱼类细菌性病害对发展鱼类养殖业构成了严重的威胁,而抗生素的滥用和病原菌耐药性的出现对鱼类养殖产量、水产品质量和养殖环境造成了严重的影响。为了推动鱼类健康养殖产业的发展,亟待创新研究鱼类病害的绿色防控技术。噬菌体作为一种天然、无残留的细菌杀手,具有特异性强、裂解效率高等特点,利用噬菌体治疗鱼类细菌性病害将是一种重要的技术途径。本文综述了噬菌体的重要资源挖掘、鱼类细菌性病害防控中的作用机制及其应用前景,并提出了在鱼类健康养殖领域加快研究噬菌体治疗技术的措施,对鱼类的健康养殖具有重要意义。
- 周方方胡胜标张友明夏立秋
- 关键词:鱼类养殖细菌性病害绿色防控技术
- 类枯草杆菌蛋白酶基因重组杀虫工程菌及其菌剂制备方法
- 类枯草杆菌蛋白酶基因重组杀虫工程菌及其菌剂制备方法。该杀虫工程菌是由苏云金芽胞杆菌的crylAc基因与一种外源毒素基因融合构建的双效工程菌,并在苏云金芽胞杆菌中表达融合杀虫晶体蛋白。所述苏云金芽胞杆菌为苏云金芽胞杆菌4....
- 夏立秋丁学知曾智孙运军张友明
- 文献传递
- 发光杆菌毒素复合体(Tc)克隆及其生物活性研究
- 李纯刘晨浪方倩于芳楠夏立秋张友明
- 苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Aa,Cry2Aa,Cry3Aa和Cry4Aa结构的计算机对比分析被引量:8
- 2008年
- 运用生物信息学软件对苏云金芽孢杆菌毒素Cry1Aa,Cry2Aa,Cry3Aa和Cry4Aa的基本参数、一级结构、二级结构、三级结构、跨膜区和表面电势进行了预测比较.它们在一级结构上有较大差异,但二级结构和跨膜区相似,三级结构中各毒素的结构域I之间基本相似,结构域II之间差异较大,其中Cry2Aa为差异最大成员.4种毒素的表面电势分布不同.毒素之间的结构相似性和差异性与其作用机理和杀虫特异性有关.
- 赵新民夏立秋王发祥丁学知单世平张友明
- 关键词:苏云金芽孢杆菌毒素生物信息学计算机