王猛
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 鼠疫耶尔森氏菌LcrV突变体的初步研究
- 鼠疫是一种自然疫源性的烈性传染病,其病原体为鼠疫耶尔森菌,历史上6世纪、14-15世纪、19世纪发生的3次世界性鼠疫大流行致使超过2亿人丧生,给人类造成了巨大的灾难。近年来随着国际反恐斗争的需要,对鼠疫的防治研究已成为国...
- 王猛
- 关键词：鼠疫耶尔森氏菌表达纯化免疫原性
- 稳定表达结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的RAW264.7细胞系的建立被引量：2
- 2011年
- 为研究结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis分泌蛋白ESAT-6(Early secreted antigenic target of 6 kDa)对巨噬细胞相关功能的影响,将正确构建的重组质粒pEGFP-C1-ESAT-6和空载体pEGFP-C1以脂质体介导的方法转染至小鼠巨噬细胞RAW264.7中,经过G418筛选后建立稳定表达EGFP-ESAT6融合蛋白以及EGFP的细胞系,并通过RT-PCR、荧光显微镜及Western blotting方法,在基因和蛋白两个水平对所建立的稳转细胞系进行鉴定。结果证实EGFP-ESAT6融合基因成功整合入RAW264.7细胞基因组并能够稳定表达,为后续的ESAT-6调控巨噬细胞机理研究提供了平台。
- 李浩殷瑛董大勇张军付玲蔡晨光王猛徐俊杰陈薇
- 关键词：ESAT-6RAW264.7稳定转染
- 无标签鼠疫耶尔森菌Ⅴ抗原突变体在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性分析
- 2012年
- 目的:在大肠杆菌中表达、纯化无标签鼠疫耶尔森菌低钙反应V抗原突变体,并对其免疫原性进行研究。方法:采用融合PCR方法将Ⅴ抗原基因中编码半胱氨酸的碱基缺失突变,将获得得Ⅴ抗原突变体基因克隆到原核表达载体pET32a(+)后转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达并进行柱层析纯化,纯化产物以Western印迹进行鉴定并免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测免疫血清效价。结果:目的蛋白在大肠杆菌中获得了可溶性高表达,经三步柱层析后纯度高于95%,经Western印迹检测可与野生型V抗原单克隆抗体特异性结合,免疫小鼠后获得高效价免疫血清。结论:获得了无标签的鼠疫耶尔森菌Ⅴ抗原突变体蛋白,并证实其具有免疫原性,将对V抗原结构和功能的研究提供帮助。
- 王猛任军张金龙李浩蔡晨光李建民陈薇
- 关键词：鼠疫耶尔森菌表达纯化免疫原性
