袁伟
- 作品数：50 被引量：91H指数：5
- 供职机构：济南军区青岛第一疗养院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
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- 重组腺病毒Ad-EGFP转染大鼠角膜的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的评价携带报告基因的重组腺病毒Ad-EGFP经不同转染途径原位转染大鼠角膜的可行性和安全性,探索重组腺病毒载体原位转染大鼠角膜的最佳途径。方法取SD大鼠80只,随机分为A、B、C、D4组,A组、B组:分别于球结膜下注射Ad-EGFP15μL及9g·L-1NaCl注射液15μL;C组、D组:分别前房注射Ad-EGFP15μL及9g·L-1NaCl注射液15μL。各组大鼠分别于注射后1d、5d、7d及14d摘除角膜,行HE染色观察角膜组织有无超微结构改变,共聚焦显微镜观察荧光表达,透射电镜观察有无病毒颗粒存在。结果 4组大鼠于注射当时及整个观察期内角膜组织各层均未见明显超微结构改变,眼前段组织未见明显的组织病理性改变;术后B、D组角膜始终未见绿色荧光的阳性表达,电镜下亦未见病毒颗粒;A、C组注射后1d角膜即可见绿色荧光;5d荧光表达最强,7d时较5d时减弱,14d时更弱。且注射1d后电镜下可见腺病毒颗粒;A组绿色荧光表达位于角膜上皮层及角膜基质层;C组绿色荧光表达仅位于角膜内皮层,角膜上皮层及基质层未见阳性表达。结论携带报告基因的重组腺病毒Ad-EGFP可通过球结膜下注射、前房注射等途径原位转染至大鼠角膜组织,且安全性好;球结膜下注射可使腺病毒携带的报告基因在角膜上皮层及角膜基质层表达;前房注射途径可使腺病毒携带的报告基因在角膜内皮层表达。
- 袁伟陆晓和宫玉波周瑾
- 关键词：重组腺病毒绿色荧光蛋白角膜
- 重组腺病毒Ad-EGFP经不同途径转染大鼠眼前段组织的实验研究
- 目的:评价重组腺病毒Ad—EGFP转染眼前段组织的可行性和安全性。方法:取Wistar大鼠,随机分为6组,每组 15只。A组,角膜基质注射Ad—EGFP(滴度为1．785× 108pfu／m1)15μl;B组,角膜基质注...
- 张永强陆晓和袁伟宫玉波周瑾彭小娟
- 关键词：重组腺病毒眼前段
- 同种异体大鼠角膜移植物TRAIL及其受体DR4的表达与免疫排斥反应的关系被引量：3
- 2005年
- 目的观察大鼠角膜移植术后角膜组织中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducingligand,TRAIL)及其死亡受体4(death receptor4,DR4)的表达情况,分析其与角膜移植免疫排斥反应的关系。方法实验对象分为移植组和对照组,移植组采用大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,术后每日观察排斥反应指数的变化,分别于术后不同时间点(7d、10d、14d)取角膜植片,采用免疫组织化学法(SABC法)检测TRAIL及DR4蛋白表达情况,并与对照组正常大鼠角膜组织TRAIL及DR4蛋白表达情况相比较。结果TRAIL及DR4主要表达于正常角膜上皮层,在基质层及内皮层有极少量表达;而移植组急性排斥期角膜植片各层TRAIL及DR4表达均增高,阳性表达主要集中在植片伤口附近的上皮层及浅层基质。结论与正常角膜相比,同种异体角膜移植术后急性排斥期植片各层TRAIL及DR4蛋白表达均增高,由此推测TRAIL及其受体DR4与角膜移植急性免疫排斥反应的发生发展有关。
- 袁伟陆晓和张永强贺玲宫玉波彭小娟
- 关键词：穿透性角膜移植肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
- 急性排斥期大鼠角膜移植物超微结构的特征性变化被引量：3
- 2005年
- 目的:研究急性排斥期同种异体穿透性角膜移植物超微结构的变化,探讨其与角膜移植排斥反应之间的关系。方法:建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,术后观察排斥反应指数变化,急性排斥期取已经发生排斥反应的角膜植片,透射电镜观察角膜植片各层超微结构的变化。并以正常大鼠角膜做对照。结果:与正常角膜相比,已发生排斥反应的角膜植片超微结构改变主要表现为细胞凋亡和细胞坏死共存的特征。结论:细胞毒性T淋巴细胞介导的细胞凋亡可能是导致角膜移植排斥反应发生的主要因素之一。
- 张永强陆晓和袁伟
- 关键词：角膜移植
- IL-1RA对急性排斥期大鼠角膜移植物TRAIL及其受体DR_4表达的影响被引量：2
- 2005年
- 目的研究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)对急性排斥期角膜移植物肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及其死亡受体-4(DR4)表达的影响。方法建立大鼠同种异体穿透角膜移植模型,设生理盐水处理组和IL-1RA治疗组。免疫组织化学法检测急性排斥期角膜植片TRAIL及DR4表达,并以正常大鼠角膜作对照。结果TRAIL及DR4在正常角膜均有表达,主要分布于上皮层。急性排斥期角膜植片各层TRAIL及DR4 表达均增高;与IL 1RA治疗组相比,生理盐水处理组TRAIL及DR4表达增高更明显。结论TRAIL及DR4的表达参与角膜移植免疫排斥反应的发生,IL-1RA可通过调节其表达抑制角膜移植免疫排斥反应。
- 袁伟陆晓和张永强宫玉波彭小娟
- 关键词：IL-1RA白细胞介素-1受体拮抗剂移植免疫排斥反应角膜植片正常角膜
- 角膜缘上皮移植联合丝裂霉素C治疗翼状胬肉
- 2005年
- 目的 探讨自体角膜缘上皮移植联合丝裂霉素C防止翼状胬肉术后复发的疗效。方法 回顾分析193例(2 2 0只眼) ,其中80只眼行自体游离球结膜移植术(A组) ,70只眼行自体游离球结膜移植术联合术中、术后应用丝裂霉素C(B组) ,70只眼行自体角膜缘上皮移植联合丝裂霉素C(C组) ,术后随访6～2 4个月,平均15个月。结果 A组16例复发,复发率2 0 0 % ,B组6例复发,复发率8 6 % ,C组2例复发,复发率2 9%。A ,B组比较(P <0 0 5 ) ,A ,C组比较(P <0 0 1) ,B ,C组比较(P >0 0 5 ) ,其中C组复发率最低。结论 自体角膜缘上皮移植联合丝裂霉素C是治疗翼状胬肉一种较理想的手术方式。
- 宫玉波陆晓和张永强柯晓云袁伟彭小娟
- 关键词：角膜缘上皮移植丝裂霉素C翼状胬肉
- γ-干扰素、白细胞介素4与CD25在角膜移植免疫排斥反应中的作用被引量：8
- 2008年
- 目的:角膜移植免疫排斥反应是一个多因素参与的调节过程,近年来研究表明细胞因子在角膜移植免疫中起重要作用。实验拟验证γ-干扰素、白细胞介素4及CD25在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用。方法:①实验于2006-10/2007-05在南方医科大学南方医院实验动物中心完成。选用Wistar大鼠24只,SD大鼠54只,实验方法符合动物伦理学要求。②将54只SD大鼠按随机数字表法分为3组,正常组6只,角膜移植组及地塞米松组均24只。后两组制备Wistar→SD角膜移植大鼠模型,受体选择右眼手术,供体提供双眼角膜。③用裂隙灯观察移植排斥情况;利用反转录-聚合酶链反应检测植片内γ-干扰素、CD25mRNA的表达;应用酶联免疫吸附实验检测房水和血清中γ-干扰素、白细胞介素4含量;应用流式细胞术检测移植前后不同时相外周血淋巴细胞CD25的表达;术后第11天,应用免疫组织化学方法检测角膜CD4+,CD8+和CD25+T细胞的表达。结果:54只SD大鼠全部进入结果分析。①地塞米松组大鼠发生角膜移植排斥反应的时间长于角膜移植组(P=0.000)。②正常角膜植片无CD25、γ-干扰素mRNA表达,角膜移植组术后第11天角膜植片内γ-干扰素、CD25 mRNA的表达较地塞米松组增强(P<0.05)。③角膜移植组角膜移植术后6,11d血清γ-干扰素含量高于正常组(P<0.05);术后11d含量高于术后6,24d(P<0.01);地塞米松组术后6,11d低于同期角膜移植组(P<0.05)。④角膜移植组角膜移植术后6,11,24d房水γ-干扰素、白细胞介素4含量均高于正常组(P<0.05);地塞米松组术后6,11d均低于同期角膜移植组(P<0.05～0.01)。⑤地塞米松组术后6,11d外周血CD3+CD25+T/CD3+T比值低于同期角膜移植组(P<0.05)。⑥术后第11天角膜移植组植片内CD4,CD8及CD25明显表达,地塞米松组CD4,CD8及CD25表达明显减弱。结论:CD25、γ-干扰素和白细胞介素4在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的�
- 宫玉波陆晓和周瑾袁伟柯晓云崔国华
- 关键词：角膜移植干扰素类白细胞介素4移植免疫
- 正常大鼠角膜NF-κB及其下游因子ICAM-1、VEGF的表达与意义被引量：1
- 2006年
- 目的:研究核因子-κB(NF-κB)及其下游因子细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮生长因子(VEGF)在正常角膜中的表达规律,为进一步研究角膜移植排斥反应的发病机制及治疗提供新的思路。方法:健康清洁级Wistar大鼠5只,体重200～250g。10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉后立即摘除眼球共10个,剪下完整角膜(带角膜缘),置于4%多聚甲醛溶液固定,常规石蜡包埋,切片。每份标本连续制作4张4μm切片,1张行HE染色,其余3张分别用于NF-κB、ICAM-1、VEGF的免疫组织化学染色(SABC法)检测。结果:正常的大鼠角膜中,NF-κB及其下游因子ICAM-1、VEGF在角膜上皮层细胞内有较弱的基础表达,主要表达在基底层细胞;而在角膜基质层及内皮细胞未见阳性表达;NF-κB、ICAM-1、VEGF在正常大鼠角膜的表达部位及表达强度具有良好的一致性。结论:NF-κB可能通过调控ICAM-1、VEGF等基因的表达,参与角膜移植排斥反应及角膜新生血管形成,起着中心调控者的作用。
- 余洪华陆晓和张永强彭小娟姚建兵袁伟
- 关键词：角膜移植血管内皮生长因子ANF-ΚB
- TRAIL/TRAILR（DR4）参与角膜移植免疫排斥反应的实验研究
- 背景：肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)又称凋亡素2配体(Apo2L)，属于肿瘤坏死因子(TNF)家族的一个新成员，DR4是TRAIL的受体之一，二者结合可介导细胞凋亡。
TRAIL及其受体与免疫调节...
- 袁伟
- 关键词：角膜移植排斥反应死亡受体环孢霉素A
- Ad-siICOS阻断ICOS共刺激通路抑制大鼠角膜移植排斥反应的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的观察携带报告基因GFP且表达ICOS-siRNA的重组腺病毒(Ad-siICOS-EGFP)阻断可诱导共刺激分子(in-ducible costimulator,ICOS)共刺激通路对角膜移植急性免疫排斥的抑制作用。设计实验性研究。研究对象Wistar大鼠(供体)及SD(受体)大鼠。方法取Wistar大鼠(供体)及SD(受体)大鼠,建立大鼠同种异体穿透性角膜移植模型,将其随机分为A、B、C、D4组,每组20只鼠:A组为单纯角膜移植对照组;B组为Ad-siICOS-EGFP注射组;C组为Ad-EGFP注射组;D组为生理盐水注射组。术后每日在裂隙灯显微镜下观察角膜植片以及眼前段组织的变化。对角膜混浊、水肿、新生血管3项指标进行评分,观察排斥反应指数(RI)的变化并记录植片的存活时间。各移植组分别于术后5天随机取10只大鼠,麻醉处死后,取植片行免疫组织化学及RT-PCR检测。各组其余大鼠进行角膜植片存活时间统计。主要指标角膜植片平均存活时间I;COS蛋白表达情况I;COSmRNA表达情况。结果各组角膜植片平均存活时间:A组(9.800±0.632)天;B组(14.700±1.418)天;C组(10.000±1.054)天;D组(10.100±0.876)天(F=52.383,P=0.000)。ICOS蛋白表达情况:各组植片均可见ICOS蛋白阳性表达,各组植片组织ICOS蛋白免疫组化染色阳性细胞评分:A组(1.900±0.568);B组(1.100±0.316);C组(1.800±0.632);D组(1.900±0.568)(F=5.214,P=0.004)I。COSmRNA表达情况:各组大鼠植片组织ICOS的PCR产物凝胶电泳条带辉度值比值:A组(1.004±0.164);B组(0.621±0.096);C组(0.929±0.134);D组(0.918±0.120)(F=16.717,P=0.000)。结论 Ad-siICOS-EGFP可有效抑制大鼠植片组织ICOSmRNA及ICOS蛋白的表达,从而阻断ICOS共刺激通路;移植术后即刻受体鼠球结膜下注射Ad-siICOS-EGFP,可抑制大鼠角膜移植急性免疫排斥反应,延长角膜植片存活时间。
- 袁伟陆晓和宫玉波周瑾
- 关键词：角膜移植可诱导共刺激分子
