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朱海东: 作品数：18 被引量：55H指数：4; 供职机构：商丘医学高等专科学校更多>>; 发文基金：河南省教育厅科学技术研究重点项目国家自然科学基金河南省科技发展计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生文化科学更多>>

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浅谈微生物与免疫学的教学方法: 2010年; 微生物与免疫学是医学生的专业基础课,微生物个体微小,结构简单,肉眼不能直接观察到,免疫学理论抽象,内容深奥,教学生在学习中很容易感到乏味,不易接受,为了激发学生的学习动机,增强学习的兴趣,进一步提高教学质量,本人在数学实践中试总结出以下几种方法。; 陈建设朱海东; 关键词：微生物免疫学教学

甲型H1N1流感流行病学特点及预防措施: 2010年; 目的:系统分析甲型H1N1流感的流行病学特点和预防控制措施。方法:采用回顾性与前瞻性相结合的方法,结合文献资料进行探讨。结果:甲型H1N1流感曾有多次暴发或流行。结论:此次甲型H1N1流感能有效预防。; 陈建设朱海东; 关键词：甲型H1N1流感

陈皮碱性提取物通过S100A9蛋白结合SRSF1调控肺纤维化被引量：1: 2024年; 目的探究陈皮碱性提取物(CAE)通过S100A9蛋白结合剪接调节蛋白(SRSF)1抗肺纤维化的分子调控机制。方法将80只C57BL/6J小鼠(体质量18~22 g)随机分为空白组、模型组、CAE组、吡非尼酮(PFD)组4个组,每组10只。采用小鼠鼻腔滴注博来霉素(BLM)建立小鼠肺纤维化模型(空白组除外),造模后成功后第1天CAE组、PFD组分别进行灌胃给药,剂量为64、300 mg/kg,模型组给予生理盐水。连续灌胃28 d后记录小鼠生存情况、体质量等生理指标,Masson染色观察肺组织胶原纤维的分布情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中转化生长因子(TGF)β1、人肺表面活性物质相关蛋白(SP)-A、SP-D含量,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测钙结合蛋白(S100A9)、SRSF1 mRNA、蛋白表达量。TGF-β1刺激人胚肺成纤维细胞(MRC-5)构建细胞纤维化模型(空白组细胞除外),药物组分别给予CAE(500μg/ml)、PFD(2 mmol/L),模型组和空白组给予培养液。Western印迹检测平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅱ型胶原(Ⅱ)蛋白表达情况,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测细胞增殖。构建重组过表达质粒pcDNA-S100A9、pcDNA-SRSF1,转染入MRC-5细胞中,并借助Western印迹检测S100A9、SRSF1蛋白表达。通过RNA结合蛋白免疫沉淀实验(RIP)、核糖核酸交互作用沉降实验(RNA pull down)验证S100A9蛋白与SRSF1的互作。结果与模型组相比,CAE组、吡非尼酮组体质量变化、存活率均明显增加,而血清肺泡炎指标含量、肺纤维化评分、肺组织中S100A9、SRSF1表达均明显降低(P<0.05)。与TGF-β1组相比,CAE组α-SMA、ColⅠ、ColⅡ蛋白相对表达量、MRC-5细胞增殖率、EdU阳性率显著降低(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-S100A9组α-SMA、ColⅠ、ColⅡ相对蛋白表达量,增殖率和EdU阳性率显著升高(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-SRSF1组α-SMA、ColⅠ、ColⅡ相对蛋白表达量,增殖率和EdU阳性率; 蒋凯朱海东吴向征陈星宇; 关键词：钙结合蛋白肺纤维化

登革2型病毒贵州分离株NS1部分基因原核表达蛋白及其多克隆抗体制备被引量：1: 2012年; 目的原核表达、纯化DENV-2贵州分离株NS1部分序列表达蛋白,并制备其多克隆抗体以研究其功能。方法合成DENV-2M株NS1部分基因序列,克隆到原核表达载体pET28(a),转化大肠埃希菌BL21(DE3);用IPTG诱导表达,Ni柱亲和层析纯化、回收融合蛋白;用纯化融合蛋白免疫BALB/c鼠,制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体效价。结果原核表达了NS1部分序列融合蛋白,并获得了其多克隆抗体,ELISA检测抗体效价为1∶800。Western blot检测该蛋白能被His标签抗体识别。结论 DENV-2M株NS1部分序列表达蛋白可诱导小鼠产生较高效价和特异性的多克隆抗体,为进一步研究DENV-2M株NS1部分序列表达蛋白的免疫原性奠定了基础。; 朱海东左丽任丽娟; 关键词：登革2型病毒多克隆抗体

两株登革2型病毒NS1基因真核重组质粒免疫BALB／c小鼠产生特异性抗体水平的比较: 2011年; 目的利用登革2型病毒（denguetype2virus，DENV2）M株和NC,C株NSl基因部分别pcDNA3．1重组质粒初次和加强免疫BALB／c小鼠，观察免疫小鼠体液免疫应答的差异。方法分别构建两株DENV2NSl基因部分序列（1—413bp）的pcDNA3．1真核重组质粒和pET28a（＋）质粒，进行原核蛋白的表达、鉴定、纯化和定量；并用pcDNA3．1重组质粒免疫BALB／c小鼠，初次免疫及第7天、14天分别加强免疫1次，共免疫3次。收集初次免疫后第7、14、28和56天外周血标本，间接ELISA法测定小鼠血清特异性IgM／IgG类抗体水平，细胞病变抑制法检测特异保护性抗体水平。结果构建了pET28a（＋）-NS1m／pET28a（＋）-NS1原核表达重组质粒，SDS-PAGE分析表明，NS1基因部分序列获得表达，其相对分子质量均约22．3×10^3；Westernblot表明该目的蛋白可与抗His标签单克隆抗体结合；经Ni柱亲和层析法得到纯度达92％的表达蛋白，对C6／36细胞有毒性，并可用于ELASA检测。不同DENV2毒株NS1基因部分序列的pcDNA3．1重组质粒初次和加强免疫BALB／c小鼠诱导特异性IgM、IgG类和中和抗体的产生存在差异，M株重组质粒加强免疫小鼠后特异性抗体效价水平较高并持续较长时间。结论DENV2两毒株NS1基因部分序列重组质粒免疫小鼠后诱生的特异性抗体类别、水平存在差异。; 任丽娟左丽朱海东胡方芳; 关键词：登革2型病毒 NS1基因重组质粒 BALB/C小鼠体液免疫应答

2型登革病毒NS1部分基因原核表达蛋白免疫小鼠后NK细胞和DCs的动态变化: 2012年; 目的:通过DENV-2NS1部分基因原核表达融合蛋白免疫BALB/c小鼠后,观察小鼠外周血及肝脏中NK细胞和DCs的动态变化。方法:用融合蛋白加弗氏佐剂经肌肉免疫BALB/c小鼠。采集各组小鼠在初次免疫及再次免疫后第12小时、24小时、72小时、7天、14天外周血及肝标本,分别采用流式细胞术测定细胞膜表面CD3-CD49b+、CD86+CD11c+分子的表达。结果:免疫组小鼠外周血细胞的CD3-CD49+表达水平在第24小时至峰值,7天至第二峰值此后下降,肝淋巴细胞的CD3-CD49+表达水平在第72小时至峰值此后下降,CD86+CD11C+表达水平至第24小时达高峰值此后下降。与正常对照组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DENV-2NS1部分基因表达原核表达融合蛋白免疫小鼠后,NK细胞和DCs反应较为迅速;且DCs有促进NK细胞的活化、增值的倾向。; 朱海东左丽陈建设崔艳梅; 关键词：流式细胞术

LncRNA ARAP1-AS1在胰腺癌中的表达及对细胞生物学的影响: 2023年; 目的检测长链非编码RNA(LncRNA)ARAP1-AS1在胰腺癌中的表达,并初步探讨其对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭生物学行为的影响。方法收集25例胰腺癌组织标本及相应癌旁组织标本,qPCR法检测ARAP1-AS1表达。体外培养人胰腺癌细胞系PANC-1,分为对照组、siRNA-对照组(转染siRNA对照序列)、敲除组(转染ARAP1-AS1 siRNA)、pcDNA3.1-对照组(转染pcDNA3.1)和过表达组(转染pcDNA3.1-ARAP1-AS1)。qPCR法检测转染效率,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,蛋白印迹(WB)法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。结果胰腺癌组织中ARAP1-AS1表达水平较癌旁组织(2.26±0.13 vs 1.00±0.00)显著升高(P<0.05)。与siRNA-对照组相比,敲除组PANC-1细胞中ARAP1-AS1水平(1.01±0.02 vs 0.29±0.03)及PCNA、Bcl-2、MMP-9蛋白水平、细胞OD值(0.57±0.05 vs 0.23±0.03)、划痕愈合率(78.53±7.02 vs 48.60±5.26)、侵袭数(229.63±22.59 vs 104.25±15.04)显著降低(P<0.05),Bax蛋白水平及细胞凋亡率(4.52±0.42 vs 32.40±1.84)显著升高(P<0.05)。与pcDNA3.1-对照组相比,过表达组PANC-1细胞中ARAP1-AS1水平(1.02±0.03 vs 2.06±0.08)及PCNA、Bcl-2、MMP-9蛋白水平、细胞OD值(0.57±0.05 vs 0.90±0.08)、划痕愈合率(77.65±6.67 vs 91.22±7.34)、侵袭数(225.34±19.65 vs 327.50±25.40)显著升高(P<0.05),Bax蛋白水平及细胞凋亡率(4.58±0.48 vs 2.29±0.24)显著降低(P<0.05)。结论 LncRNA ARAP1-AS1在胰腺癌中高表达,其能促进胰腺癌细胞PANC-1增殖、迁移及侵袭,减少细胞凋亡。; 丁战伟朱海东李志彬吴远宏; 关键词：胰腺癌细胞生物学

微生态制剂在新生儿抗生素相关性腹泻中的应用研究被引量：5: 2012年; 近年来，由于广谱抗生素在临床上的广泛应用，严重破坏了人体内正常菌群之间的平衡，甚至引起菌群失调。目前，在新生儿科临床上存在着抗生素无指征、无目的的滥用现象，严重威胁了新生儿的健康，现在住院新生儿已较为普遍地使用抗生素，; 陈建设邹荣建邢秀伟朱海东叶珊珊王立娟楮丽霞; 关键词：微生态制剂新生儿抗生素腹泻

登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列pcDNA3.1载体的构建: 2009年; 目的:克隆登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列,构建NS1基因部分序列的真核表达载体。方法:用PCR技术扩增登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列,并定向克隆入pcDNA3.1(+)的kpnⅠ、xhoⅠ位点,构建真核重组载体pcDNA3.1(+)-NS1,转化EcoliDH5a。阳性重组质粒用PCR、酶切及序列测定等方法鉴定。电穿孔法将真核重组载体转染COS-7细胞,RT-PCR鉴定其表达情况。结果:阳性质粒经kpnⅠ及xhoⅠ双酶切及PCR获得了1个核苷酸长度为413 bp的基因,序列测定证实与NGC株NS1基因部分基因序列有99%同源,重组真核质粒转染COS-7细胞经RT-PCR鉴定证实有表达。结论:成功构建了含有登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列基因的真核重组载体pcDNA3.1(+)-NS1。; 任丽娟左丽朱海东; 关键词：登革热病毒克隆细胞

感染2型单纯疱疹病毒对人宫颈上皮细胞自噬活性及IFN-β、IL-6表达的影响被引量：4: 2018年; 目的探讨2型单纯疱疹病毒(HSV-2)对人宫颈上皮细胞HCE自噬及干扰素β(IFN-β)、IL-6表达的影响。方法将体外培养的人宫颈上皮细胞HCE分为观察组和对照组,观察组用Vero细胞病毒接种HSV-2,对照组正常培养不进行处理。收集对照组和观察组感染HSV-2后1、4、11、18、22 h的细胞,采用免疫荧光法(FITC)检测各组细胞荧光强度,采用Western blotting法检测各组细胞LC3Ⅱ表达量;收集对照组和观察组感染HSV-2后1、4、11、18、22 h的细胞,采用ELISA法检测上清液IFN-β、IL-6。结果感染HSV-2后观察组细胞荧光强度、LC3Ⅱ表达量及上清液IL-6、IFN-β水平迅速升高,与对照组相比,P均<0.05。至感染后4 h观察组细胞荧光强度、LC3Ⅱ表达量及上清液IL-6、IFN-β水平均达到峰值,然后缓慢下降。结论感染HSV-2可以提高人宫颈上皮细胞自噬活性及IFN-β、IL-6表达,且感染早期效果较强。; 谢春朱海东马红英李静; 关键词：2型单纯疱疹病毒宫颈上皮细胞干扰素Β 白细胞介素6

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