王金子
- 作品数：23 被引量：23H指数：3
- 供职机构：广西大学农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 板栗疫病菌致病力基因P5Cdh及其应用
- 本发明公开了一种影响真菌致病力和产孢的板栗疫病菌致病力基因P5Cdh及其应用。该基因含有3个外显子和2个内含子，DNA全长2270bp，cDNA全长1782bp，编码594个氨基酸，表达的蛋白质如SEQ.ID.No.3所...
- 陈保善姚姿婷邹承武周辉王金子卢立丹李洋
- 板栗疫病菌中一个依赖于经典分泌途径的无信号肽分泌蛋白的鉴定被引量：2
- 2016年
- 依赖于内质网/高尔基体的经典分泌途径是胞外分泌的主要途径。传统上认为,经典分泌途径所分泌的蛋白,通常都具有信号肽和高尔基体定位信息。经典分泌途径分泌蛋白由内质网向高尔基体运输,需要COPI小泡作为载体,而布雷非德菌素A(BFA)可以抑制COPI被膜小泡的形成,最终阻断分泌蛋白由内质网向高尔基体的运输。为建立一个简便的鉴别经典分泌途径分泌蛋白的方法,本研究从板栗疫病菌(Cryphonectria parasitica)分泌蛋白组数据库中选择一个不具有信号肽、跨膜区和高尔基体定位信息的氧化还原酶(POR),通过构建POR-GFP融合蛋白,观察其在野生型菌株和在受BFA处理菌株中的细胞定位,发现该融合蛋白的细胞内分布在野生型菌株呈弥散型分布,而在BFA处理菌株时呈聚集型分布,表明其在细胞内由内质网到高尔基体的运输受到了抑制。该结果表明,POR的分泌依赖于经典分泌途径,属于经典途径分泌蛋白。因此,GFP融合蛋白结合BFA处理可以准确鉴定经典途径分泌蛋白。
- 罗德朋蓝颖王金子陈保善
- 关键词：板栗疫病菌氧化还原酶BFA
- 受低毒病毒调控的板栗疫病菌总蛋白质组学
- 2014年
- 【目的】为解析低毒病毒调控板栗疫病菌生理性状和致病性的机制,在总蛋白质组水平上寻找受病毒侵染调控的宿主蛋白及其编码基因。【方法】使用双向电泳方法对野生型菌株EP155和受低毒病毒感染的菌株EP713进行差异蛋白质组分析,同时,对差异表达蛋白质编码基因的mRNA水平进行定量分析。【结果】共找到71个因病毒侵染而发生差异表达的蛋白质点,分别属于58种不同蛋白质。以EP155为对照,表现为上调的19个,下调的52个,主要涉及能量代谢,蛋白质、核酸和碳水化合物代谢,信号传导以及压力应激和氧化还原反应。对10个受病毒调控的蛋白的编码基因进行了mRNA水平定量,其中7个基因受病毒感染后的mRNA水平变化与蛋白水平变化趋势一致,3个基因的mRNA水平变化与蛋白水平变化趋势不相符,表明低毒病毒对板栗疫病菌不同基因的调控可以发生在不同的调控层面上。【结论】低毒病毒的侵染弱化了宿主TCA循环的能量流动,调控了宿主体内的甲基化过程及真菌致病因子的表达。
- 王金子卢立丹杨彦彦陈琦陈保善
- 关键词：板栗疫病菌
- 板栗疫病菌致病力基因Prodh及其应用
- 本发明公开了一种板栗疫病菌致病力基因Prodh及其应用。该基因含有2个外显子和1个内含子，DNA全长1585bp，cDNA全长1413bp，编码438个氨基酸，表达的蛋白质如SEQ.ID.No.3所示，该蛋白可用于调控板...
- 陈保善姚姿婷邹承武周辉王金子卢立丹
- 板栗疫病菌产孢基因Pro1及其应用
- 本发明公开了一种板栗疫病菌产孢基因Pro1及其应用。该基因含有4个外显子和3个内含子，DNA全长1641bp，cDNA全长1416bp，编码471个氨基酸，表达的蛋白质如SEQ.ID.No.3所示，该蛋白可用于调控板栗疫...
- 陈保善姚姿婷邹承武周辉王金子卢立丹
- 板栗疫病菌致病力基因P5Cdh及其应用
- 本发明公开了一种影响真菌致病力和产孢的板栗疫病菌致病力基因P5Cdh及其应用。该基因含有3个外显子和2个内含子，DNA全长2270bp，cDNA全长1782bp，编码594个氨基酸，表达的蛋白质如SEQ.ID.No.3所...
- 陈保善姚姿婷邹承武周辉王金子卢立丹李洋
- 板栗疫病菌分泌蛋白质的提取和双向电泳分析
- 比较了3种提取板栗疫病菌分泌蛋白质样品的方法,其中,改良Sevage法效果最好,双向电泳分离了250个蛋白质点,是硫酸铵沉淀法的3倍左右。用飞行质谱仪鉴定了190个蛋白质,分别属于133种蛋白质。使用ProtComp 8...
- 王金子施涯邻商巾杰陈保善
- 关键词：分泌蛋白质板栗疫病菌双向电泳分析
- 板栗疫病菌产孢基因Pro1及其应用
- 本发明公开了一种板栗疫病菌产孢基因Pro1及其应用。该基因含有4个外显子和3个内含子，DNA全长1641bp，cDNA全长1416bp，编码471个氨基酸，表达的蛋白质如SEQ.ID.No.3所示，该蛋白可用于调控板栗疫...
- 陈保善姚姿婷邹承武周辉王金子卢立丹
- 一种适用于双向电泳分析的高效真菌线粒体提取及蛋白质制样方法被引量：5
- 2013年
- 用液氮冷冻研磨法破碎真菌菌丝细胞,通过差速和蔗糖密度梯度离心分离纯化板栗疫病菌线粒体,所得线粒体产率(质量比)约为1/10~4。电子显微镜观察和蛋白印迹表明,所制备的线粒体完整性好,没有检测到其它细胞成分的污染。使用膜蛋白裂解液溶解线粒体制备蛋白样品,将蛋白样品200μg上样于pH3~10,24cm的非线性胶条进行等电聚焦,电聚焦后再进行第二向SDS-PAGE电泳分离,经银染获得重复性好、背景清晰、分辨率高(680±15个蛋白质点)的凝胶图谱。随机选择10个蛋白质点进行质谱分析,9个获得有效注释,均为线粒体特异性蛋白质,表明所制备的蛋白样品非常适合双向电泳分析及其后续的质谱鉴定。
- 密克王金子纪水养陈琦陈保善
- 关键词：板栗疫病菌线粒体双向电泳
- 鼻咽癌细胞辐射抗拒的比较蛋白质组学分析被引量：2
- 2012年
- 目的通过分离并鉴定具有不同辐射抗拒的人鼻咽癌细胞株CNE-2R与CNE．2的差异表达蛋白，探讨与鼻咽癌细胞辐射抗拒相关的分子机制。方法分别提取鼻咽癌辐射抗拒细胞株CNE-2R及其亲本细胞株CNE-2的总蛋白，采用双向凝胶电泳分离，经软件分析识别差异表达蛋白点，应用基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱技术（MALDI-TOF-MS）鉴定差异蛋白质。结果两种不同辐射敏感性的鼻咽癌细胞株CNE-2R和CNE-2中，共筛选出差异表达明显的蛋白质点有32个，其中11个蛋白质被鉴定成功，在CNE．2R中上调的蛋白有3个，下调的蛋白有8个。结论不同辐射敏感性的鼻咽癌细胞的差异表达蛋白，主要涉及调节凋亡、DNA损伤与修复、细胞周期调控、RNA转录、细胞信号转导、细胞骨架组成及辐射应激反应等多个方面。
- 朱小东黄诗婷曲颂苏芳郭亚王金子
- 关键词：鼻咽癌比较蛋白质组学
