龚振华
- 作品数:22 被引量:61H指数:6
- 供职机构:上海市儿童医院更多>>
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- 胰胆合流异常胆汁和血清淀粉酶的二维电泳被引量:1
- 2005年
- 目的 通过二维电泳分析胰胆合流异常(PBM)患者的胆汁和血清淀粉酶的等电点和相对分子质量 (Mr)。方法 通过醋酸纤维素薄膜电泳,将正常人血清和PBM患者胆汁和血清中淀粉酶初步分离提纯,继经 等电聚焦和SDS-PAGE二维电泳,测定淀粉酶同工酶的Mr和等电点。结果 在醋酸纤维素薄膜电泳中,淀粉 酶泳动在γ球蛋白负极侧,显示出2条谱带。在二维电泳中,正常人血清淀粉酶的2个同工酶分别是等电点 p16.4(Mr≈54×103)和等电点p16.7(Mr≈55×103)的两个点:PBM患者胆汁和血清中,存在6个淀粉酶同工酶 点,除了上述正常人血清淀粉酶的两个主要点之外,在p16.8和p17.2分别出现Mr≈55×103两个新点,在p16. 0和p16.2分别出现Mr≈53×103-54×103的两个新点。结论 在PBM患者胆汁和血清中,淀粉酶存在6种 同工酶,这一系列同工酶的Mr都接近正常的55×103,而等电点分布在p16.0到p17.2之间的6个点上,而正常 人血清淀粉酶只存在两种同工酶。
- 龚振华肖现民徐绍英张祥民
- 关键词:胆汁血清淀粉酶二维电泳等电聚焦SDS-PAGE
- 一种串联质谱非衍生化法检测试剂盒
- 本发明涉及化学分析检测技术领域,具体涉及一种串联质谱非衍生化法检测试剂盒。本发明公开了一种串联质谱非衍生化法检测试剂盒,其包含同位素标记氨基酸标准品混合物、同位素标记酰基肉碱标准品混合物、萃取液、流动相,其特征在于所述萃...
- 龚振华
- 文献传递
- 非衍生化串联质谱法检测酰基肉碱方法的应用被引量:9
- 2011年
- 目的建立非衍生化串联质谱检测酰基肉碱的方法,以便用于有机酸和脂肪酸代谢病的检测和筛查。方法使用含13种稳定同位素标记的酰基肉碱内标准品的溶剂萃取滤纸干血片中的游离肉碱和酰基肉碱,串联质谱仪直接进样,检测游离肉碱(C0)、乙酰基肉碱(C2)、丙酰基肉碱(C3)、丁酰基肉碱(C4)、异戊酰基肉碱(C5)、戊二酰基肉碱(C5DC)、己酰基肉碱(C6)、辛酰基肉碱(C8)、葵酰基肉碱(C10)、十二烷酰基肉碱(C12)、十四烷酰基肉碱(C14)、十六烷酰基肉碱(C16)和十八烷酰基肉碱(C18)的浓度。分析该方法的精确性、准确性及稀释回收率。结果低浓度酰基肉碱的批内变异系数(CV)为6.61%~10.97%之间,批间CV为13.31%~18.98%;高浓度酰基肉碱的批内CV为5.74%~12.13%,批间CV为12.70%~18.88%。除C5DC外,其余酰基肉碱的偏倚为-15%~20%;酰基肉碱不同稀释浓度的回收率在90%~115%之间,实测值与预测值的相关系数(r)为0.97~0.99。结论非衍生化串联质谱检测酰基肉碱有较高的精确性和准确度,有临床应用价值。此技术可以作为新生儿遗传代谢病筛查的常规技术。
- 田国力龚振华王燕敏
- 关键词:酰基肉碱串联质谱
- 不同年龄胆总管囊肿的临床与肝纤维化特点探讨被引量:1
- 2002年
- 目的 探讨不同年龄胆总管囊肿的临床与肝脏纤维化特点与相互关系。方法 分析12例婴儿及36例幼儿、儿童胆总管囊肿的临床资料;肝组织HE染色观察纤维化程度和炎性细胞浸润情况,免疫组化染色观察细胞角化蛋白(AE1/AE3)、人类组织相容性抗原DR(HLA—DR)表达,并与18例胆道闭锁作对照。结果 婴儿胆总管囊肿黄疸出现率12/12,显著高于幼儿儿童组8/36(P<0.01);肝纤维化程度、小叶周边AE1/AE3阳性细胞和HLA—DR在肝脏表达显著高于非婴儿组(P<0.01),低于胆道闭锁组(P<0.01)。肝纤维化程度与黄疸及肝小叶周边AE1/AE3表达分级呈正相关(P<0.05)。结论 婴儿胆总管囊肿以黄疸为主要临床表现,其肝纤维化重于幼儿及儿童组,胆道梗阻和胆小管增生可能是其发生肝纤维化的原因。
- 龚振华肖现民郑珊周以明吕志葆陈莲
- 关键词:胆总管囊肿肝硬化年龄因素
- 串联质谱检测酰基肉碱和氨基酸在鉴别婴儿黄疸中的应用被引量:7
- 2012年
- 目的串联质谱检测筛查滤纸血片中氨基酸、肉碱和酰基肉碱鉴别诊断胆道闭锁和胆汁淤积症。方法研究对象是年龄大于1个月,小于5个月的黄疸患儿。胆道闭锁组(BA)13例;胆汁淤积症(IC)12例;婴儿肝炎综合征13例。采用31例同年龄段的无肝病的门诊小手术患儿等作为对照组。非衍生化法前处理标本,串联质谱检测11种氨基酸、游离肉碱和30种脂酰基肉碱。结果BA组血中游离肉碱(66±20)μmol/L,显著高于IC组的(50±19)μmol/L(P〈0.05);和对照组的(30±10)〉μmol/L(P〈0.01)。用游离肉碱增高作为诊断BA的指标,其ROC曲线下面积(0.862),优于总胆红素、直接胆红素/总胆红素、碱性磷酸酶和总胆酸。BA组和IC组甘氨酸、丙氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、鸟氨酸、蛋氨酸等显著高于对照组;IC组亮氨酸(88±27)μmol/L、缬氨酸(90±31)μmol/L、(亮氨酸+缬氨酸)/酪氨酸之比2.70±0.82,显著低于BA组的(115±28)μmol/L、(116±27)μmol/L,3.51±0.83,P〈0.05和对照组的(106±31)μmol/L、(103±26)μmol/L、4.29±0.94。结论串联质谱检测血中氨基酸、游离肉碱和脂酰基肉碱对鉴别婴幼儿黄疽有很高的参考价值。
- 龚振华田国力吕志宝景虹胡志红李敏
- 关键词:串联质谱法氨基酸类肉碱胆道闭锁
- 胆红素的临床意义及检测方法研究进展被引量:5
- 2018年
- 新生儿高胆红素血症是新生儿期常见的疾病,发生率为60%~80%,大多数为生理性,通过合适的喂养或光疗等治疗可恢复正常,但仍有小部分患儿因诊疗不及时引起死亡或神经发育异常后遗症,如智力低下、听力障碍、脑瘫、癫痫和自闭症等陋,因此,新生儿高胆红素血症早期合理诊治十分重要。
- 韩美林龚振华
- 关键词:胆红素新生儿黄疸
- 新生儿期至青春期血中肉碱和酰基肉碱的变化被引量:8
- 2010年
- 目的 用串联质谱测定不同年龄儿童血中游离肉碱和各种酰基肉碱浓度,为诊断肉碱缺乏和各种有机酸和脂肪酸代谢病奠定基础.方法 研究对象是围产期新生儿1376例,大于1周的新生儿49例,小于1岁的婴幼儿64例,1~15岁儿童401例.围产期新生儿是无选择的产院出生儿,包括了少量早产儿和低出生体重儿.其余主要是排除了发热、腹泻、肝病、严重疾病等影响脂肪代谢的门诊小手术的体检儿童.用非衍生法前处理滤纸血片,串联质谱测定其中游离肉碱和30种酰基肉碱浓度.结果 游离肉碱(C0)、短链酰基肉碱(C2、C3、C4、C5)、中链酰基肉碱(C6、C8、C 10)及其烯酰基、羟基、二酰基肉碱和总肉碱水平新生儿阶段较低,1~3个月时最高,之后降低,2~15岁在相同水平维持.长链酰基肉碱(C12、C14、C16、C18)及其烯酰基肉碱、羟基酰基肉碱及其总和新生儿阶段最高,逐渐降低,2~15岁在相同水平维持.游离肉碱浓度(23.387±7.702)μmol/L,(30.064±8.252)μmol/L,(25.021±6.630)μmol/L,总长链酰基肉碱浓度(4.998±1.557)μmol/L,(2.854±0.821)μmol/L,(2.459±0.553)μmol/L,肉碱酰基肉碱总浓度(43.497±12.632)μmol/L,(49.013±12.497)μmol/L,(39.656±9.257)μmol/L在新生儿组、小于1岁组和大于1岁组差异有统计学意义(P<0.01).围产期新生儿男婴组肉碱(24.115±7.715)μmol/L和肉碱和酰基肉碱总和(43.65±5.252)μmol/L分别高于女婴(22.696±7.246)μmol/L和(41.90±5.038)μmol/L(P<0.05).新生儿组游离肉碱占总肉碱比值(54.0%±7.1%)明显小于非新生儿组(62.1%±6.1%,P<0.05),而长链(33.5%±6.0%)、中链(1.3%±0.3%)和短链脂酰基肉碱(11.6%±2.5%)与总肉碱比值分别高于非新生儿组(30.1%±4.9% 0.9%±0.6% 6.5%±2.3%,P<0.05).结论 1岁以内血中肉碱和酰基肉碱水平和构成变化较大,在评价肉碱营养状态和诊断有机酸和�
- 龚振华田国力王燕敏
- 关键词:串联质谱法肉碱年龄因素
- 十二指肠乳头位置与胰胆管合流异常被引量:7
- 2004年
- 目的观察十二指肠乳头开口位置与胰胆管合流异常(PBM)的关系。方法对64例伴有PBM的先天性胆总管囊肿(CBD)患儿、10例伴有PBM和30例无PBM的成人胰胆疾病患者的胆道造影进行分析,乳头开口于十二指肠第2段中1/3定为正常开口组,开口于第2段下1/3、第2、3段交界处和第3段的定为易位开口组;测乳头距十二指肠第2、3段交界处距离,实测长度除以椎体高度取得校正值。结果CBD患儿十二指肠乳头开口于第2段中1/3、下1/3、第2段与第3段交界处和第3段的分别占42%、22%、27%和9%。易位开口组和正常开口组的共通管长度校正值分别为0.89±0.42和0.66±0.31,P=0.03,囊肿长度校正值分别为3.0±1.1和2.2±0.5,P=0.001。共通管长度与乳头距十二指肠第2、3段交界处距离的相关系数为0.297,P=0.038。成人10例PBM患者中8例(80%)存在乳头易位开口,30例无PBM患者中12例42%存在乳头易位开口,两组间差异有显著性(P=0.03)。结论在伴有PBM的CBD患儿和胰胆疾病成人患者中,十二指肠乳头向远端开口易位发生率显著高于无PBM的病人,乳头开口越远,共通管越长。
- 龚振华肖现民周以明郑珊胡冰龚彪
- 关键词:胰胆管合流异常先天性胆总管囊肿胰胆管造影十二指肠乳头
- 串联质谱筛查新生儿低血糖初探
- 新生儿低血糖造成的脑损伤是不可修复的,因此通过新生儿筛查及早发现低血糖很有意义。采用含已知浓度同位素标记葡萄糖的甲醇萃取液,萃取新生儿筛查滤纸血片,每份萃取液通过2分钟串联质谱检测得出血中己碳糖浓度。指出,串联质谱检测筛...
- 龚振华田国力
- 关键词:低血糖新生儿患者血液学检测串联质谱技术
- 文献传递
- 非衍生化串联质谱技术在氨基酸代谢障碍患儿诊断中的应用被引量:7
- 2011年
- 【目的】应用非衍生化串联质谱技术检测多种氨基酸,以便用于氨基酸代谢障碍的检测和筛查。【方法】使用含11种稳定同位素标记的氨基酸内标准品的溶剂萃取滤纸干血片中的氨基酸,直接进样串联质谱仪,检测丙氨酸(Ala),精氨酸(Arg),瓜氨酸(Cit),谷氨酸(Gly),亮氨酸(Leu),蛋氨酸(Met),鸟氨酸(Orn),苯丙氨酸(Phe),脯氨酸(Pro),酪氨酸(Tyr),缬氨酸(Val)的浓度。分析该方法的精确性和准确性;并应用于1 093例高危儿童的筛查和诊断。【结果】低水平浓度氨基酸的批内CV为5.84%~9.57%,批间CV为13.89%~18.65%;高水平浓度酰基肉碱的批内CV为4.57%~8.78%,批间CV为13.55%~17.25%;测定值与靶值的偏倚为4.24%~16.16%,平均相对偏倚为4.10%;检出5种共11例氨基酸代谢障碍,包括高苯丙氨酸血症4例,枫糖浆尿症3例,瓜氨酸血症2例、酪氨酸血症及精氨酸血症各1例。【结论】非衍生化串联质谱检测氨基酸有较高的精确性和准确度,有临床应用价值。
- 田国力龚振华王燕敏姚静
- 关键词:氨基酸串联质谱