刘新发
- 作品数：17 被引量：67H指数：6
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- 多发性骨髓瘤细胞中一个新的Alu超基因家族成员的克隆与分析被引量：2
- 2002年
- 根据Genebank收录的多发性骨髓瘤细胞株 (ARH 77)表达上调ESTAF4 97797设计引物 ,采用半定量RT PCR证实了多发性骨髓瘤患者及正常人骨髓细胞中该expressedsequencetags(EST)存在表达差异 .用ESTAF4 97797作探针筛选人胚肾cDNA文库 ,获得cDNA克隆经测序并用生物信息学方法对该序列进行了初步分析 .AF4 97797在多发性骨髓瘤患者骨髓中确有较高的表达 ,而在正常人骨髓细胞中低表达 .获得的全长cDNA克隆序列长 1 2 4 8bp(Genebank登录号 :AY0 94 6 1 2 ) .生物信息学分析显示该片段全长cDNA编码 4 4个氨基酸的蛋白产物且可能属于Alu家族成员 .基因AY0 94 6 1 2为一个在多发性骨髓瘤中表达上调的新基因 ,其改变可能与多发性骨髓瘤的发生与发展有关 .
- 汤立军胡维新何莉芳范启兰田菁燕刘新发
- 关键词：多发性骨髓瘤细胞基因克隆基因表达
- 10种常见细菌基因检测膜条的研制被引量：1
- 2011年
- 以16S rRNA基因为检测靶基因,设计10种常见细菌的DNA探针,将探针固定于硝酸纤维素膜条;PCR扩增细菌的16S rRNA基因片段并标记生物素后与膜条杂交;采用碱性磷酸酶标记的链亲和素检测生物素标记,以NBT/BCIP显色。该膜条不仅能单独检测10种细菌中的任何一种,也能同时检测5种细菌。该方法具备高通量、低成本、快速、准确等特点,具有良好的临床应用前景。
- 朱飞舟陈利玉刘新发田奇谈成欧阳方丹吴正理陈汉春
- 关键词：基因芯片细菌RRNA
- 食管鳞癌抑癌基因PTEN杂合性缺失和突变分析
- 目的:探讨10q23.3的LOH(杂合性缺失)及定位在这一区域的抑癌基因PTEN(phos-phatase and tensin homologue deleted on chromosome 10)在原发性食管鳞癌中发...
- 吴颜晖陈汉春李新梅刘新发曹燕飞
- 关键词：食管鳞癌杂合性缺失抑癌基因突变分析
- 文献传递
- 中国湖南人群GSTM1和GSTT1基因多态性与肺癌易感性关系的研究被引量：15
- 2004年
- 应用病例-对照分析研究(对照组205例,肺癌病例组104例),抽提静脉血基因组DNA,采用PCR及多重PCR方法,检测谷胱甘肽转移酶GSTM1和GSTT1单独及联合缺失基因型的遗传多态性在中国湖南人群中肺癌患者和正常人群体中的分布,探讨这些多态性基因型与肺癌易感性的关系.结果显示GSTM1-/-基因型在湖南地区居民肺癌群体和正常对照人群中的频率分别为62.5%和46.3%(P<0.05);肺癌患者组GSTT1-/-基因型的频率(66.3%)显著高于正常对照组(42.4%)(P<0.05).GSTM1-/-和GSTT1-/-联合基因型在肺癌组和正常对照组中的频率分别为41.3%和22.4%(P<0.05).SPSS11.5软件统计学分析表明,这些基因型在肺癌患者组和正常对照组人群中的发生频率具有显著性差异.由此可知GSTM1基因缺失和GSTT1基因缺失分别与肺癌的易感性相关;GSTM1和GSTT1基因联合缺失与肺癌的发生和发展呈现显著正相关.
- 曹燕飞陈汉春刘新发刘清霞张济吴颜晖李新梅
- 关键词：多态性GSTM1基因肺癌易感性
- 中国人食管鳞癌10q23微卫星不稳定和杂合性缺失初步探讨被引量：11
- 2004年
- 吴颜晖陈汉春刘新发李新梅曹燕飞
- 关键词：PTEN杂合性缺失微卫星不稳定性银染
- 两种慢性髓系白血病细胞系对干扰素-α的不同反应性
- 目的:利用两种慢性髓系白血病细胞系(KT-1/A3,K562)研究干扰素-α(IFN-α)治疗慢性髓系白血病(CML)的作用机理。方法:(1)不同浓度IFN-α作用两种细胞,用MTT和软琼脂集落形成实验检测IFN-α对两...
- 李新梅陈汉春吴颜晖刘新发曹燕飞
- 关键词：慢性髓系白血病干扰素-Α细胞系
- 文献传递
- 东方田鼠长江亚种和指名亚种基因组DNA序列比较分析
- 根据东方田鼠基因组DNA序列片段(Genbank登录号:AF277394),用PCR技术扩增东方田鼠长江亚种(Microtus Fortis calamorum)和宁夏指名亚种(Microtus Fortis forti...
- 许冰胡维新杨榕王勇刘新发彭兴华
- 关键词：指名亚种东方田鼠基因组DNA
- 文献传递
- FAAP的原核表达、纯化与抗体制备
- 2011年
- 目的构建pET28a-FAAP-H is原核表达载体,表达H is-FAAP融合蛋白,制备FAAP蛋白的多克隆抗体。方法构建pET28a-FAAP-H is原核表达载体,转化到大肠杆菌BL21中并诱导表达H is-FAAP融合蛋白,用纯化的FAAP蛋白免疫昆明小白鼠后,制备多克隆抗体,通过W estern blotting检验抗血清的特异性和灵敏性。结果成功构建pET28a-FAAP-H is原核表达载体。在大肠杆菌BL21中经1 m M的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside,IPTG)37℃诱导4 h后,融合蛋白有很高水平的表达。W esternblotting结果显示FAAP抗体能够有效地检测人血管内皮脐静脉细胞内FAAP蛋白的表达。结论成功地对FAAP进行了原核表达、纯化,抗FAAP小鼠的多克隆抗体具有较好的特异性,为进一步研究FAAP的结构与功能奠定了坚实的基础。
- 刘新发李镇安王行明郭海峰郭红山王丽丁乃峥
- 关键词：原核表达BLOTTING多克隆抗体
- 多发性骨髓瘤细胞中一个Alu超基因家族成员的克隆与表达分析
- 目的:克隆多发性骨髓瘤恶性相关基因及分析其在多种不同肿瘤及正常组织中的表达。方法:根据Genebank收录的多发性骨髓瘤细胞株(ARH-77)表达上调EST AF497797设计引物,采用半定量RT-PCR证实了多发性骨...
- 汤立军谢萍芳范启兰田菁燕刘新发胡维新
- 关键词：多发性骨髓瘤细胞基因家族ALU
- 文献传递
- 洞庭湖日本血吸虫疫区东方田鼠生化与分子遗传学标记的初步研究被引量：8
- 2002年
- 目的 建立东方田鼠生化与分子遗传学标记检测法。方法 参考近交系小鼠、大鼠生化遗传标记检测方法 ,对东方田鼠某些同功酶进行活性测定。根据东方田鼠特异DNA序列 ,合成引物 ,扩增东方田鼠基因组DNA ,将PCR产物回收、序列分析并进行生物信息学分析。结果 东方田鼠Trf、Es 3和Ce 2三个生化位点呈现遗传多态性 ,而Id1、Mod 1、Car 2、Gpd 1、Gpi 1、Hbb、Es 1七个生化位点无遗传多态性。用合成的特异引物扩增东方田鼠基因组DNA ,得到了丰富的多态性资料。对其中的 2 0只东方田鼠的扩增产物进行测序并进行多序列比较 ,发现10个等位基因以及 16个单核苷酸多态性 (SNP)位点。结论 初步建立了东方田鼠生化及分子遗传学标记。分子遗传学标记与生化遗传标记相比 ,具有杂合率高、重复性好、易于操作等优点。这些结果为深入研究东方田鼠的遗传背景、生物进化规律积累了基础资料。
- 胡维新杨榕许冰曾海涛刘新发彭兴华
- 关键词：洞庭湖东方田鼠生化遗传标记单核苷酸多态性
