贾永清
- 作品数：48 被引量：186H指数：8
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省“十五”科技攻关项目黑龙江省自然科学基金“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 猪传染性胃肠炎病毒重组核蛋白的纯化与Dot-ELISA抗体检测方法的建立被引量：12
- 2002年
- 将重组猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)N基因原核表达载体pProEXHTb转化的大肠埃希氏菌 ,用IPTG诱导表达核蛋白 ,经过Ni NTA柱的纯化 ,获得纯化核蛋白。以该蛋白制备抗原 ,建立了以TGEVN蛋白重组抗原的Dot ELISA诊断技术 ,其抗原最适包被量为 1μg ,抗原预点膜在 4℃可保存 5周以上。本法快速简便 。
- 姜骞唐丽杰李一经贾永清
- 关键词：抗体检测传染性胃肠炎病毒纯化DOT-ELISA
- 猪轮状病毒中国分离株JL94 VP7基因的克隆与序列分析被引量：4
- 2003年
- 用 MA10 4细胞培养增殖了轮状病毒地方分离株 JL94。利用一对根据 Genebank中已发表的轮状病毒 VP7基因c DNA序列而设计并合成的引物 ,通过反转录—聚合酶链反应 (RT- PCR)从 JL94毒株扩增出 VP7基因全长 c DNA。将其插入p MD18- T载体中 ,构建了重组质粒 p MD18- T- JL 94 / VP7,并对其进行了 Hind ,Hind 和 Bam H 的单、双酶切初步鉴定及其核苷酸序列测定 ,证明克隆的 p MD18- T- JL94 / VP7为轮状病毒的 VP7基因。通过核苷酸序列比较 ,JL94 / VP7与 A群猪轮状病毒 C134/ VP7、OSU / VP7、ICB2 185 / VP7、YM/ VP7核苷酸序列同源性分别为 87%、99%、74 %和 83%。
- 师东方李一经贾永清王君伟刘宝全徐宏军陈淑红
- 关键词：轮状病毒中国分离株VP7基因克隆
- 鹅细小病毒VP3基因重组禽痘病毒的构建和表达被引量：15
- 2003年
- 本实验采用质脂体转染方法将禽痘病毒转移载体质粒PSY6 81VP3LacZ转染被禽痘病毒FPV_0 17感染的鸡胚成纤维细胞CEF ,通过蓝白筛选和 6轮蚀斑克隆纯化 ,获得了稳定的重组病毒。PCR鉴定 ,重组病毒基因组中含有VP3基因。Dot_ELISA实验证明 ,重组病毒表达了VP3,并具有抗原性。
- 赵丽荣王君伟贾永清
- 关键词：鹅细小病毒VP3重组禽痘病毒
- 马鹿肠毒血症的诊断
- 1998年
- 1995年11月份以来,黑龙江省某鹿场马鹿群先后发生以拉稀、神经症状和急性死亡为特征的疾病,经实验室诊断为魏氏梭菌引起的肠毒血症,因此次发病表现较为典型现报告如下。 1 发病情况 1995年入冬以来,某养鹿场为增加膘情,从11月初开始给马鹿增补以玉米和豆饼为主的精料,在补料的第七天个别鹿表现精神不振,排黄色水样稀便。
- 李一经贾永清
- 关键词：马鹿肠毒血症
- ELISA技术及其在禽病诊断中的应用被引量：5
- 2006年
- 曲站红邓国华贾永清
- 关键词：ELISA技术禽病诊断ELISA试剂盒单克隆抗体技术抗原抗体反应免疫测定
- 鸡T细胞受体的研究进展被引量：1
- 1997年
- 李一经贾永清刘宝全
- 关键词：T细胞受体
- 猪传染性胃肠炎病毒国内分离株S基因克隆及与国外分离株的同源性比较被引量：5
- 2002年
- 用猪睾丸细胞增殖并扩增猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV)国内分离株TH 98,根据基因库中已发表的TGEVS基因cDNA序列 ,利用Oligo软件设计并合成 2对引物 ,进行逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,扩增出 2 .3kb和 2 .1kb2个片段 ,即Sa与Sb。将Sa与Sb先后插入到pUC18质粒载体上的EcoRⅠ和PstⅠ多克隆位点上 ,构建了重组质粒pUC S。根据TGEVS基因位点和 pUC18的物理图谱 ,用相应的限制性内切酶进行酶切及套式PCR方法鉴定、分析 ,证明克隆的pUC S为TGEVS基因。同时对pUC S进行序列测定分析 ,并与来自美国、英国和日本的 5个毒株进行核苷酸及编码氨基酸同源性比较 。
- 任晓峰李一经贾永清王君伟刘宝全
- 关键词：分离株传染性胃肠炎病毒S基因同源性
- 猪轮状病毒国内分离株JL94 VP7基因克隆与真核表达质粒的构建被引量：3
- 2002年
- 用MA10 4细胞培养增殖了轮状病毒地方分离株JL94。利用一对根据Genebank中已发表的轮状病毒VP7基因cDNA序列而设计并合成的引物 ,通过逆转录—聚合酶链反应 (RT_PCR)从JL94毒株扩增出VP7基因全长cDNA。将其插入pMD18_T载体中 ,构建了重组质粒pMD18_T_JL94 /VP7,并对其进行了HindⅢ ,HindⅢ和BamHⅠ的单、双酶切初步鉴定及其核苷酸序列测定 ,证明pMD18_T_JL94 /VP7中的插入基因为轮状病毒的VP7基因。重新设计一个带有Kozak序列的上游引物 ,通过PCR扩增出带有Kozak序列的vp7基因并将其插入pMD18_T载体中构建了重组质粒pMD18_T_VP7,酶切鉴定其大小和方向后 ,与真核表达载体pcDNA 3.1(+)分别用HindⅢ和BamHⅠ双酶切 ,胶回收纯化后连接。经酶切和核苷酸序列检测鉴定 。
- 师东方李一经范锡龙贾永清王君伟刘宝全陈淑红
- 关键词：猪轮状病毒国内分离株基因克隆真核表达质粒VP7基因RT-PCR
- 表达禽流感病毒血凝素基因重组禽痘病毒的构建
- 将AIV广东分离株A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)HA基因正向克隆于pSY538的EcoR Ⅰ位点,将LacZ报告基因插入Sma Ⅰ位点,然后切取含外源基因和报告基因的Not Ⅰ片段克隆于pSY6...
- 贾永清乔传玲张建林于康震刘宝全
- 关键词：禽流感HA基因重组禽痘病毒
- 文献传递
- 人工感染猪弓形虫病血清抗体消长规律的研究被引量：3
- 1997年
- 根据10头人工感染猪IHAT和ELISA血清抗体检测结果表明，所有被检动物感染后第14天血清抗体达到阳性滴度，第21天抗体滴度达到高峰，第28天开始下降。ELISA比IHAT抗体检出时间早，抗体滴度高，维持阳性抗体滴度的时间长。水试验研究结果表明，猪弓形虫病血清学诊断的最佳时间为感染后14～28天。
- 贾永清李一经
- 关键词：弓形虫病ELISA抗体滴度猪病
