吴晓燕
- 作品数:55 被引量:58H指数:5
- 供职机构:山东省农业科学院更多>>
- 发文基金:现代农业产业技术体山东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项资金系建设专项资金山东省科技发展计划项目山东省农业科学院青年科研基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 人工改造的PCV2 Rep蛋白、重组PCV2病毒及其应用
- 本发明涉及基因工程技术领域,特别涉及一种人工改造的PCV2 Rep蛋白,还涉及重组PCV2病毒及其应用。本发明提供一种人工改造的PCV2 Rep蛋白,缺失了野生型PCV2 Rep蛋白第6‑8位的三个氨基酸SGR,和/或在...
- 李俊张玲玲时建立彭喆吴晓燕王金宝郑书轩辛长勋
- PCV2、PRV、PPV多重PCR检测方法的建立及其应用被引量:3
- 2019年
- 根据GenBank中已发表的猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)有关基因序列,通过序列比对及参考相关文献,设计了3对特异性引物。通过优化,建立了可同时检测PCV2、PRV及PPV 3种病毒的多重PCR方法。结果表明,该方法能同时检测到PCV2、PRV及PPV的最低核酸量分别为40pg、72pg、46pg。对猪圆环病毒3型(PCV3)、猪细环病毒(TTSuV)、猪流行腹泻病毒(PEDV)、猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)无扩增。应用该方法对87份临床样品进行检测,PCV2阳性检出率为28.7%(25/87),PRV野毒检出率为11.5%(10/87),PPV检出率为12.6%(11/87)。其中2种以上病毒混合感染阳性率为13.8%(12/87),3种病毒同时感染的阳性率为2.3%(2/87),其结果也与单一PCR结果一致。研究结果提示,该方法可用于PCV2、PRV、PPV三种病原的单一感染或混合感染的鉴别诊断。
- 辛长勋郑书轩时建立彭喆吴晓燕高梅刘玉伟王硕王金宝李俊
- 关键词:猪伪狂犬病毒猪细小病毒
- 一种二联灭活疫苗及其制备方法
- 本发明提供了一种二联灭活疫苗,含灭活的猪圆环病毒2型Cap蛋白和猪肺炎支原体,所述Cap蛋白编码基因序列如SEQ ID NO.1所示,所述猪肺炎支原体保藏号为:CGMCC No.18879。解决了猪圆环病毒2型和猪肺炎支...
- 李俊吴晓燕时建立彭喆徐绍建王硕李琛刘畅韩红
- 一种偶联COS的PCV2d型PCV2亚单位疫苗
- 本发明属于兽医药技术领域,提供了一种偶联COS的PCV2d型PCV2亚单位疫苗。该疫苗的抗原为COS偶联PCV2d Cap蛋白,通过巯基化Cap蛋白和马来酰亚胺化COS反应获得。该COS偶联PCV2d Cap蛋白,相比未...
- 李俊张成鑫刘畅时建立李琛吴晓燕徐绍建韩红王硕
- 一种调控PCV2在宿主细胞中复制的方法及应用
- 本发明提供了一种调控PCV2在宿主中复制的方法及应用。通过METTL14基因、FTO基因和miR30a‑5p可以调控PCV2病毒在宿主中的复制。METTL14可引起m6A甲基化水平升高促进PCV2病毒的复制,FTO能够使...
- 李俊时建立彭喆杨莹李琛刘畅徐绍建田瑶李佳昕吴晓燕王硕韩红
- 一种PCV2-SVA二联苗
- 本发明属于兽药生产技术领域,提供了一种PCV2‑SVA二联苗。该疫苗以去除核定位信号的PCV2 Cap蛋白和SVA VP2蛋白为抗原。本发明通过杆状系统高效表达了可溶性PCV2 Cap蛋白和SVA VP2蛋白。由于免疫协...
- 李俊何芳李琛刘畅时建立吴晓燕徐绍建韩红王硕
- HSP90调控塞尼卡病毒复制中的应用
- 本发明属于分子生物学和兽医药领域,提供了HSP90及其抑制剂在调控塞尼卡病毒复制中的应用。HSP90抑制剂可用于制备抑制塞尼卡病毒药剂,HSP90及其编码基因可用于筛选治疗或预防塞尼卡病毒药剂。本发明提供的HSP90及其...
- 刘畅李俊李琛时建立马英茹吴晓燕徐绍建韩红格拉布琴科·娜塔莉亚郑理美
- PCV2 Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响被引量:1
- 2015年
- N-糖基化对病毒的感染与增殖均具有重要作用,与PCV2复制相关的Rep蛋白含有三个N-糖基化位点。为了分析PCV2Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响,本试验构建了三个双拷贝突变体感染性克隆2M23、2M256、2M286,并成功拯救病毒。通过间接免疫荧光检测病毒的拯救效果,TCID50测定病毒的感染力,荧光定量PCR检测细胞病毒的载量。结果显示,PCV2Rep蛋白的23~25aa、256~258aa N-糖基化位点突变后降低病毒的复制能力,而286~288aa突变后增强病毒的复制能力,为进一步阐明PCV2的复制及致病机制提供参考。
- 徐胜男时建立彭喆徐绍建吴晓燕丛晓燕杜以军吴家强李俊王金宝
- 关键词:REP蛋白
- 猪圆环病毒2型特异性荧光定量PCR检测方法的建立与应用被引量:6
- 2011年
- 研究旨在建立基于SYBR Green I荧光定量PCR检测PCV 2的技术方法。根据GenBank中的猪圆环病毒2型(PCV 2)的基因序列(HQ148879),设计一对特异性引物,利用普通PCR技术扩增出PCV 2的ORF2基因702bp片段,并克隆到pVAX1载体,以纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为阳性标准品,摸索荧光定量PCR试验,并绘制标准曲线,以此建立一种荧光定量PCR特异性检测猪圆环病毒的方法。结果表明,该方法对PCV 2有很好的特异性,其敏感性比常规PCR高100倍,批间与批内重复试验变异系数均小于2.5%。经临床应用表明荧光定量PCR方法的建立实现了对PCV 2特异性的快速诊断和定量检测。
- 吴晓燕刘涛李俊时建立韩偲刘洋吴家强周顺王金宝
- 关键词:猪圆环病毒2型SYBRI荧光定量PCR特异性
- HSP70调控塞尼卡病毒复制中的应用
- 本发明属于分子生物学和兽医药领域,提供了HSP70及其抑制剂在调控塞尼卡病毒复制中的应用。HSP70抑制剂可用于制备抑制塞尼卡病毒药剂,HSP70及其编码基因可用于筛选治疗或预防塞尼卡病毒药剂。本发明提供的HSP70及其...
- 李琛李俊时建立刘畅 马英茹吴晓燕徐绍建韩红 郑理美