李丽薇
- 作品数：87 被引量：66H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 表达PEDV S蛋白优势抗原区域的重组PRRSV活载体疫苗株的鉴定
- 2025年
- 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)和猪流行性腹泻(PED)是当前对养猪业影响较大的两种重要传染病,为了开发可同时针对这两种疫病的疫苗,本研究以PRRSV HuN4-F112活疫苗株为载体,将PEDV S蛋白中可诱导产生中和抗体的抗原区域进行优化和组合,命名为SNE,利用反向遗传操作技术将其引入至HuN4-F112株基因组中,构建了含有SNE的PRRSV全长cDNA克隆pHuN4-F112-SNE,通过病毒拯救获得了重组病毒rHuN4-F112-SNE株,经过对重组病毒引入基因和表达蛋白的鉴定,证实获得的重组病毒rHuN4-F112-SNE能够正确表达PEDV S蛋白优势抗原区域,其生物学特性与亲本毒株相似。将该重组病毒连续传至30代,引入的SNE基因均能获得稳定表达,且不影响亲本毒复制和自身蛋白的表达,表明重组病毒rHuN4-F112-SNE中引入的SNE基因可稳定遗传,研究结果为后续评价rHuN4-F112-SNE作为二价基因工程活载体疫苗的有效性奠定了基础。
- 劳梦琴刘瑞琳陈鹏飞黄世静于家荣朱钧锐孙祁虞凌雪高飞姜一峰童武刘长龙李丽薇于海童光志周艳君
- 关键词：PEDVS蛋白PRRSV重组病毒
- 一株串联表达非洲猪瘟病毒P30、P54基因重组伪狂犬病毒基因工程疫苗及其应用
- 本发明提供一株串联表达非洲猪瘟病毒P30、P54基因重组伪狂犬病毒基因工程疫苗及其应用，本研究以PRV JS‑2012‑ΔgI/gE株为基础，利用同源重组的方法，将现今国内流行的非洲猪瘟病毒的主要抗原蛋白(P30、P54...
- 童武周艳君童光志包玮玲高飞郑浩李国新于海单同领姜一峰虞凌雪刘长龙李丽薇孔宁
- 一种调节MHC-II类反式激活因子CIITA基因的猪繁殖与呼吸综合征病毒活疫苗的构建及其应用
- 本发明涉及一种定点突变的猪繁殖与呼吸综合征病毒，其特征在于能够恢复调控MHC‑II类分子抗原递呈途径的关键基因CIITA的表达。所述的突变猪繁殖与呼吸综合征病毒将Nsp4调控CIITA的关键氨基酸位点199突变成天冬氨酸...
- 姜一峰沈奇李丽薇虞凌雪高飞童光志周艳君刘长龙
- 猪PCSK9单克隆抗体的制备及其在PRRSV感染过程中的应用
- 2023年
- 实验室前期shot-gun质谱结果表明PCSK9在PAM空细胞和PRRSV感染组PAM细胞间存在差异表达。为了深入研究PCSK9与PRRSV间的相互作用机制,本实验在体外合成猪PCSK9基因并克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28aPCSK9。利用该原核表达系统获得了高效表达的重组蛋白PCSK9(约75kDa),进一步通过镍柱亲和层析技术纯化重组蛋白PCSK9作为免疫原,皮下免疫5-6周龄的BALB/c小鼠(100ng/只),获得了1株产生PCSK9特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株(2A2B12)。应用此单克隆抗体对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染PAM细胞后的内源性PCSK9变化情况进行了检测。Western blot和IFA结果表明本实验制备的PCSK9单克隆抗体具有良好的特异性,抗体针对的表位位于PCSK9的C端结构域(463-705 aa);此外,Western blot结果表明PRRSV感染可抑制PCSK9蛋白的表达,过表达PCSK9对PRRSV的复制有明显的抑制作用。本研究中研制的抗体可为今后猪源PCSK9与PRRSV的相互作用研究提供工具支持。
- 张玉娇刘长龙姜一峰姜一峰周艳君虞凌雪李丽薇周艳君童光志高飞
- 关键词：PCSK9单克隆抗体PRRSV
- 三株与HP-PRRSV疫苗株高度同源的高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒的分离鉴定
- 引言 2012年江苏省某未使用过HP-PRRSV疫苗的猪场保育猪群中出现疑似PRRS症状,导致大部分仔猪死亡。从发病猪血清中分离到三株猪繁殖和呼吸综合征病毒,命名为NT1、NT2和NT3,鉴定分析结果显示三株病毒可能来源...
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- 关键词：疫苗株高致病性
- 现阶段国内猪繁殖与呼吸综合征病毒流行情况分析
- <正>引言猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)自1996年首次在国内分离以来不断变异,2006年出现高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)给我国养猪业造成了巨大损失。近些年来PRRSV变异株在田间不断出现,包...
- 姜一峰虞凌雪高飞李丽薇周艳君张玉娇李国新童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗株PRRSV
- PRRSV强弱毒感染猪肺泡巨噬细胞microRNA表达谱的差异分析
- <正>猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是动脉炎病毒属的成员,可引起猪繁殖与呼吸综合征。该病以母猪晚期流产和仔猪呼吸疾病为主要特征,每年给养猪业带来巨大损失,故确定PRRSV感染对细胞基因调控网络的影响是当务之急。小的...
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- 关键词：肺泡巨噬细胞
- 表达荧光素酶基因的重组PRRSV在指征病毒增殖中的应用
- <正>猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征的致病病原,目前PRRS已成为危害世界养猪业的重要疫病之一。本研究基于高致病性PRRSV细胞致弱株HuN4-F112的反向遗传操作平台,运用SOE PCR...
- 高飞李丽薇姜一峰虞凌雪张玉娇杨莘周艳君童光志
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光素酶基因病毒增殖生物学特性
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株作为外源基因表达活病毒载体的研究被引量：2
- 2023年
- 利用反向遗传操作技术,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)也可以被用作外源基因表达的活载体。前期研究将猪瘟病毒E2蛋白的编码基因插入了高致病性PRRSV弱毒疫苗株HuN4-F112的非结构蛋白和结构蛋白编码间区,所拯救的重组病毒rPRRSV-E2能够在体外和体内高效表达E2蛋白。能够为猪瘟和HP-PRRS的感染提供100%的免疫保护。本研究利用rPRRSV-E2的全长感染性克隆平台,在PRRSV基因组ORF7和3'非翻译区之间插入了转录调控序列6(TRS6)和绿色荧光蛋白的编码基因,构建并拯救了重组病毒rPRRSV-E2-EGFP,该病毒感染MARC-145细胞后,可以同时表达猪瘟E2蛋白和EGFP。外源序列在载体中能够保持遗传稳定。本研究为开发PRRSV作为病毒活载体疫苗提供了一个新的外源基因插入位点和构建策略,对今后多价疫苗的研发有重要意义。
- 陈金霞张宽张玉娇杜楠楠郑海红李丽薇周艳君周艳君童武虞凌雪童光志童武
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒外源基因表达
- 一种重组表达PEDV S蛋白受体RBD结构域的PRRSV活载体疫苗株的构建及应用
- 本发明提供一种重组表达PEDV S蛋白受体RBD结构域的PRRSV活载体疫苗株的构建及应用，结果表明拯救出的重组病毒rHuN4‑F112‑SRBD1能够表达PEDV S蛋白RBD功能域的优势抗原区域，且重组病毒的生物学特...
- 周艳君童光志劳梦琴陈鹏飞虞凌雪高飞姜一峰刘长龙童武李国新于海李丽薇郑浩
