金洪涛
- 作品数：67 被引量：103H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金吉林省应用基础研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学理学更多>>
- 新型抗病毒蛋白CVN的构建及原核表达被引量：3
- 2007年
- 目的构建重组抗病毒蛋白CVN原核表达载体,并进行表达和鉴定。方法采用全基因合成的方法合成目的基因CVN(Cyanovirin-N),将该片断插入到pBluescriptⅡSK(+)载体中后,亚克隆至原核表达载体pET28a(+),构建pET-CVN表达载体,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。用SDS-PAGE,Western-blot等方法分析鉴定表达产物。结果合成的目的基因全长303bp,重组载体pET-CVN经PCR和双酶切鉴定,证实构建成功。将其导入大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达产物相对分子量为17 000左右,与理论预期值完全相符。凝胶成像分析表明最高表达量可占菌体总蛋白的46.4%。SDS-PAGE,West-ern-blot分析表明目的蛋白得到了很好的表达。结论成功构建了pET-CVN原核表达载体,并得到了大量的表达,为进一步研究其生物学功能奠定了坚实的基础。
- 刘玉生李昌金宁一于芳金洪涛
- 关键词：抗病毒蛋白原核表达CYANOVIRIN-N
- 单链抗体标联SEA的抗HIV基因工程靶向药物构建与活性研究
- 如何根除 HIV 感染者或 AIDS 患者体内的病毒细胞储存池,是当前限制 AIDS 治疗的最大瓶颈问题。本研究立足于靶向杀伤 HIV 感染细胞的目的,通过合成可作为导向的抗 HIV-1gp120(gp41)单链抗体基因...
- 李昌金宁一金洪涛王宏刘玉生于芳佟敬山胡宁宁
- 关键词：单链抗体SEA靶向药物活性研究基因工程
- SARS病毒N蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化与鉴定
- 将编码SARS病毒核衣壳蛋白(N蛋白)全基因进行人工合成,克隆到pET-28a(+)和pETcks载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达.利用SARS患者恢复期已知的SARS抗体阳性血清,鉴定重组蛋白.SDS...
- 王瑞琳金宁一赵博金洪涛王宏郑敏
- 关键词：严重急性呼吸道综合症SARS核衣壳蛋白大肠杆菌免疫应答重组疫苗
- 人工设计的HIV-1重组鸡痘病毒诱导恒河猴产生免疫应答的研究
- 2007年
- 将人工设计的HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒rFPV-MEGp24大量制备并纯化后,分别在0周、8周、18周肌肉注射至实验恒河猴中,在第2次免疫后2周和第3次免疫后2周采集血液,分离血清和外周血淋巴细胞（PBMC）,ELISA法检测血清HIV-1抗体和PBMC培养上清Th1类细胞因子的含量,MTT法测定PBMC的增殖能力,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测PBMC特异性CTL杀伤活性。结果表明：HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒可刺激恒河猴产生HIV-1特异性抗体;免疫猴的PBMC在HIV-1抗原肽刺激下细胞增殖能力加强,针对HIV-1靶细胞的特异性CTL杀伤活性产生,分泌Th1类细胞因子IFN-γ、IL-2的水平升高。研究提示,HIV-1多表位-p24嵌合基因重组鸡痘病毒能诱导恒河猴产生特异性细胞和体液免疫应答。
- 张立树金宁一宋英洪宝庆马鹤雯尚玉璞王宏孙岩松金洪涛战大伟李昌
- 关键词：人免疫缺陷病毒I型重组鸡痘病毒恒河猴免疫应答
- 治疗用质粒DNA的纯化工艺被引量：6
- 2008年
- 目的探索适合大规模生产治疗用质粒DNA的纯化工艺。方法采用中空纤维柱收菌、碱裂解,再应用中空纤维柱浓缩质粒,经分子筛、亲和、离子交换等层析分离纯化质粒DNA,并应用凝胶电泳、PCR、核酸蛋白检测仪、BCA蛋白检测试剂盒和内毒素检测试剂盒对所纯化的质粒DNA进行全面检定。结果所获得的超螺旋质粒DNA达到样品总质粒的91.2%;质粒DNA总纯度为1.8;内毒素含量小于10EU/mg;几乎检测不到蛋白质残留,未检出基因组DNA残留。各项指标均符合有关质量标准。结论所采用的纯化工艺省时省力,制备的质粒DNA纯度高,适用于大规模生产治疗用质粒DNA。
- 丛艳昭鲁承金宁一申镇维梁晓枫金洪涛白靓牟伟锋于长勇常巧呈齐楷金明杰
- 关键词：质粒DNA纯化层析
- HIV-1多表位治疗性DNA疫苗构建研究
- @@艾滋病的发生与流行，不仅严重威胁人类生命健康与社会经济稳定持续发展，而且也对科学界提出严峻挑战。最新统计数据表明，全球艾滋病感染人数愈3300多万;我国亦超过80多万;平均每天全球就新增大约6800多名感染者。如此庞...
- 李昌李霄田明尧申镇维金洪涛金宁一
- 关键词：DNA疫苗艾滋病疫苗人体临床试验
- 新型鸡痘病毒重组转移载体的构建
- 本文将鸡痘病毒的TK基因分三段经PCR克隆,在每两个片断中间设计酶切位点XhoⅠ和HindⅢ/SacⅠ,并连入pMD载体中.由早晚期启动子p7.5控制的筛选标记基因gpt和由晚期启动子pL控制的报告基因LacZ串联后,克...
- 李臻金宁一金洪涛郑敏付延军辛苏文
- 关键词：鸡痘病毒TK基因
- 表位及多表位疫苗的研究进展
- 随着分子免疫学的飞速发展,人们对于抗原诱导机体免疫反应的机制有了更加深入的了解。同时发现,对于一个大的抗原分子来说,通过免疫细胞的加工、提呈,最后与效应细胞识别、作用的部分只有8-16个左右大小的氨基酸组成的多肽,通常称...
- 金洪涛金宁一李臻
- 关键词：多表位疫苗MHC疫苗开发免疫应答反应
- 军用动物福利保障措施探讨
- 军用动物是一个特殊的动物群体，是世界各国军事装备的重要组成部分。文分析和借鉴了《美军军犬计划》等文献中对动物福利保障的措施，依据军用动物在实验、训练、执行演习和作战任务的特殊性，探讨了保障其福利的办法。
- 侯延光金洪涛杨松涛钱军韩铁夏志平张勇刘林娜孙玉成岳玉环
- 关键词：动物福利
- 抗HIV-1单链抗体基因的表达及重组毒素的构建
- 抗体在诊断和治疗领域日益受到人们的重视，随着基因工程技术的发展，小分子抗体如单链抗体(ScFv)等也走到了免疫和治疗的前台，尤其是在导向药物领域占据着无可比拟的优势。为了获得针对HIV的无毒副作用的，能根除体内病毒的药物...
- 金洪涛
- 关键词：毕赤酵母重组免疫毒素
