刘洋
- 作品数:42 被引量:188H指数:7
- 供职机构:中国动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目科技基础性工作专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 鸡传染性喉气管炎病毒核酸检测用定性标准物质的研制被引量:2
- 2021年
- 本研究以鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗株为原料,通过病毒繁殖、外源病毒检验、灭活、冻干等步骤,成功制备鸡传染性喉气管炎病毒核酸检测用定性标准物质。采用荧光定量PCR方法对标准物质进行均匀性评估、稳定性监测以及由多家实验室合作定值,并对其进行了临床试用。结果表明,所研制的标准物质纯净,均匀性和稳定性良好,定性准确,无外源病毒污染,无生物传染风险;标准物质在-20℃、4℃、25℃、37℃环境下可分别稳定保存至少12个月、60 d、7 d、3 d;经7家有实验室检测资质认证的实验室合作定值,结果均为鸡传染性喉气管炎病毒阳性。本研究所制备的标准物质可用于鸡传染性喉气管炎病毒核酸检测相关实验室的质量检定和控制、仪器校准、检测方法评价等。
- 王乃迪黄袁慧陈玉红高晓艺刘洋顾小雪辛盛鹏王传彬刘玉良
- 关键词:传染性喉气管炎病毒标准物质核酸
- 促进目的蛋白分泌的多肽及其相关生物材料与应用
- 本发明公开了促进目的蛋白分泌的多肽及其相关生物材料与应用。该多肽是SP<Sub>Uspmut</Sub>或SP<Sub>Uspmut</Sub>‑leiss:所述SP<Sub>Uspmut</Sub>的氨基酸序列为序列表...
- 倪建强杨林王传彬王玉田原霖汪葆玥李文合寇占英刘洋胡冬梅周智翟新验
- 2014年我国鸡群中禽网状内皮组织增生症血清学调查被引量:6
- 2015年
- 为了解我国鸡群中禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的感染状况,本研究于2014年在全国30个省份采集了来自28个父母代(含)以上种鸡场、56个商品代场和59个散养鸡群的共计5 814份血清样品,采用ELISA方法对REV抗体水平进行了检测。结果显示,有27个省份存在REV抗体阳性,表明REV的感染在我国具有较为广泛的地理分布。在所有受检血清样品中,有734份样品呈现REV抗体阳性,平均阳性率为12.6%(734/5 814)。种鸡场、商品代场和散养鸡群的REV抗体阳性率分别为9.3%(437/4 685)、21.6%(178/824)和39.0%(119/305),表明REV感染率呈现出从种鸡场到散养户逐级升高的趋势。本研究调查结果为我国家禽的REV防控工作提供参考。
- 杨卫铮韩雪张倩刘玉良刘洋孙晓东王传彬
- 关键词:禽网状内皮组织增生症病毒种鸡场
- 我国种鸡主要疫病净化现状和对策被引量:15
- 2016年
- 种源的疫病净化是我国养鸡产业当前面临的重要问题。文章就禽类重要疫病对我国养鸡业的影响、我国种鸡场重要疫病流行概况、种鸡场疫病净化现状等进行分析,指出我国种鸡场疫病净化面临的问题,提出推动种鸡场疫病净化的对策与建议。
- 韩雪顾小雪王传彬张倩刘玉良刘洋毕一鸣翟新验辛盛鹏
- 关键词:种鸡场疫病净化禽流感禽白血病鸡白痢
- 基于纳米孔测序技术对兔腹泻病原的鉴定被引量:4
- 2022年
- 为了探索纳米孔测序技术在动物传染病病原快速诊断中的应用价值,采集1只发生腹泻实验兔的肝脏和脾脏进行核酸提取、建库和纳米孔测序分析,同时对该腹泻的实验兔分别进行细菌分离鉴定和腹泻相关病毒的血清学检测。结果显示:纳米孔测序方法运行3 h后,获得1.9 GB的数据量,检出756521条序列,平均序列长度为2549.9个碱基。根据对测序数据的生物信息学分析表明,引起实验兔腹泻的病原可能为大肠杆菌。对同批送检的6只实验兔采用常规细菌分离鉴定方法在实验兔的心脏血样品、肝脏、肺脏和回盲部内容物中只分离到了大肠杆菌。对腹泻相关病毒的血清学检测结果显示6只送检的兔均为兔轮状病毒阴性。本研究采用纳米孔测序技术对发生腹泻的实验兔进行诊断,其结果与常规实验室检测方法获得的结果相符合,表明纳米孔技术在动物传染病病原快速检测中具有潜在的应用价值。
- 董浩刘洋冯育芳邢进许中衎李楠邢壮壮王吉李晓波陈玲玲付瑞梁春南
- 关键词:细菌分离大肠杆菌腹泻
- 鉴定或辅助鉴定鸭坦布苏病毒的成套试剂及其应用
- 本发明公开了鉴定或辅助鉴定鸭坦布苏病毒的成套试剂及其应用。该鉴定或辅助鉴定鸭坦布苏病毒的成套试剂,其名称为FE1‑RE1‑PE1,FE1‑RE1‑PE1由名称为FE1‑RE1的PCR引物对和名称为PE1的探针组成;FE1...
- 刘洋顾小雪王传彬霍斯琪蔡林李晓霞刘玉良韩雪张倩杨卫铮毕一鸣刘祎祎谢雨薇宋晓晖翟新验
- 非洲猪瘟病毒微滴数字PCR检测方法的建立被引量:41
- 2019年
- 建立一种具有高灵敏度的检测非洲猪瘟病毒的微滴数字PCR方法,为非洲猪瘟的快速诊断和流行病学研究提供技术支持。在《OIE陆生动物诊断与疫苗手册》中提供的qPCR检测方法的基础上,建立了非洲猪瘟病毒微滴数字PCR方法,对该方法的敏感性、特异性和重复性进行了评估。结果显示,该方法的最低检测限可达0.8copies/μL,敏感性高于qPCR方法,不与猪常见的6种病毒发生交叉反应,而且重复性较好。采用建立的微滴数字PCR和OIE的qPCR方法分别对78份临床病料进行非洲猪瘟病毒的检测,结果显示2种方法的符合率为100%。本研究建立的微滴数字PCR方法具有理想的敏感性和特异性,适用于临床上非洲猪瘟病毒的检测。
- 原霖董浩倪建强刘洋陈亚娜杨林宋晓晖王传彬
- 关键词:非洲猪瘟荧光定量PCR
- 猪圆环病毒1型和2型核酸定性标准样品的研制被引量:1
- 2021年
- 为了研制猪圆环病毒1型(PCV1)、猪圆环病毒2型(PCV2)核酸定性标准样品,分别将PCV1和PCV2病毒全序列克隆至pMD18-T载体中并进行稀释分装。制备后进行均匀性评估、稳定性评估、定值和临床试用。结果:制备的标准样品的参考值分别为:1.33×10^(4) copies/μL(PCV1)和1.11×10^(4) copies/μL(PCV2);样品均匀;-20℃可稳定保存24个月以上,4℃可稳定2个月以上。经国家标准化管理委员会组织的专家评审,达到了国家标准样品的要求,可作为核酸扩增检测的猪圆环病毒核酸标准样品。
- 董浩原霖毕一鸣刘洋刘颖映刘玉良陈亚娜顾小雪王传彬
- 关键词:猪圆环病毒核酸扩增
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒通用微芯片荧光定量RT-PCR方法的建立和初步应用被引量:3
- 2021年
- 为建立一种可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)通用的核酸检测技术,本研究根据已发表的多株PRRSV ORF6(M)基因保守序列,设计特异性引物和探针,通过优化反应体系和条件,成功建立了一种可用于PRRSV通检的微芯片荧光RT-PCR检测方法。结果显示,该方法特异性强,与多种常见的猪病病毒均无交叉反应;通检性好,可以检出包括美洲型、欧洲型、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒以及NADC30-like等多种基因型PRRSV毒株;灵敏性好,检测下限为1×10^(1)TCID_(50)/mL,与常规荧光RT-PCR方法一致;重复性好,批内和批间重复性变异系数均小于4%;且成本低,模板用量少,反应快速,全程仅需61 min;对80份临床样品的检测结果与常规荧光RT-PCR的符合率为100%。本研究建立的微芯片荧光定量RT-PCR技术为PRRSV的快速、通用型检测提供了有力的技术支撑。
- 陈玉红徐琦刘玉良王传彬周智张硕倪建强刘洋
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒荧光定量RT-PCR微芯片
- 不同方法检测鸡白痢沙门氏菌抗体消长规律的比较研究被引量:12
- 2018年
- 为比较不同方法检测鸡白痢沙门氏菌抗体消长的规律,以便为种鸡场净化提供科学指导,本研究以鸡白痢沙门氏菌活菌和灭活免疫原分别接种SPF鸡,采用平板凝集、微量凝集和ELISA试验定期检测血清中的特异性抗体,并以Kappa检验判定不同检测方法之间的一致性程度。结果显示,平板凝集试验在接种后检出抗体阳转的时间早于ELISA,但ELISA检出抗体阳性的持续时间更长,且更符合抗体消长规律;3种检测方法的结果之间仅具有微弱一致性(Kappa系数为0.002~0.295)。本研究结果表明,不同鸡白痢沙门氏菌抗体检测方法之间存在较大差异,但从总体来看,ELISA无假阳性干扰,检出抗体的持续时间较长,更符合抗体消长规律,在单一鸡白痢沙门氏菌感染的情况下,更有利于种鸡场对该病进行净化。
- 刘洋李丹王传彬霍斯琪刘玉良顾小雪
- 关键词:鸡白痢沙门氏菌抗体平板凝集试验ELISA