冯善伟
- 作品数：88 被引量：355H指数：9
- 供职机构：中国残疾人联合会更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部临床学科重点项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学社会学经济管理更多>>
- 小鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法的建立被引量：2
- 2009年
- 目的建立培养小鼠骨髓间充质干细胞(none mesenchymal stem cells,BMSCs)的分离培养方法。方法采用全骨髓体外分离并采用差速贴壁法纯化扩增C57BL/6小鼠BMSCs,形态学观察细胞生长情况,流式细胞仪检测其表面抗原情况并观察其多项分化潜能。结果使用该方法纯化扩增的BMSCs形态均一,生长良好,表达CD29、CD44和Sca-1,不表达CD11b、CD45和CD34,并具有成骨成脂潜能。结论通过全骨髓贴壁法可以成功的分离培养出小鼠BMSCs。
- 于美娟张雅妮冯善伟熊符张成
- 关键词：骨髓间充质干细胞小鼠细胞培养
- 假肥大型肌营养不良症患者及携带者的致病基因突变检测
- 2008年
- 目的检测假肥大型肌营养不良症患者及携带者的dystrophin基因致病突变类型，为防止假肥大型肌营养不良症的再发提供信息。方法利用多重引物连接依赖式扩增技术和变性高效液相色谱技术检测临床研究发现的20例假肥大型肌营养不良症患者的DMD基因突变。结果缺失突变10例，重复突变1例，终止密码子突变4例，5例未发现致病突变。结论通过致病突变的检测可以为防止患者家庭假肥大型肌营养不良症的再发提供优生优育指导。
- 申本昌苏全喜冯善伟梁颖茵张成
- 关键词：点突变携带者
- 脐血干细胞移植治疗假肥大型肌营养不良症被引量：19
- 2005年
- 目的比较假肥大型肌营养不良症(Duchennemusculardystrophy,DMD)患者经脐血干细胞移植治疗前后其肌肉再生、抗肌萎缩蛋白表达和运动功能的改变;以及评价治疗的安全性。方法对1例经基因分析和肌肉活检及抗肌萎缩蛋白检测确诊的、已丧失行走能力的DMD患儿,经HLA配型,在脐血库中寻找到一个全相合的脐血供体。采用白消安+环磷酰胺+兔抗胸腺淋巴细胞球蛋白预处理后进行异基因脐血干细胞移植;术后采用环孢素A和骁悉方案预防移植物抗宿主反应(graftversushostreaction,GVHD)。同时定期检测原发病的生化指标如血清肌酸激酶(creatinekinase,CK)、造血重建的植入证据(血型转变、肌肉和血液系统的聚合酶链反应短串联重复序列分析)、缺陷基因是否纠正、新生肌肉是否出现、肌肉中抗肌萎缩蛋白是否表达和运动功能是否改善。结果(1)中性粒细胞在脐血干细胞移植后第15天(+15天)达到0.5×109/L,白细胞在+25天达正常水平;血小板于+22天达到20×109/L;血红蛋白维持于85～100g/L。术后140天骨髓穿刺提示三系生长旺盛;(2)移植后140天血型转为供体AB型。至今没有出现移植物抗宿主反应。(3)术后18天、30天、43天、55天、74天、233天患者外周血DNA和术后140天、183天、235天骨髓细胞DNA经PCRSTR检测为供者独立植入;(4)患儿术后60天取外周血做基因分析,显示19号缺失的外显子得到完全纠正,患儿转变为正常基因型;(5)患儿在移植后75天的肌肉活检可见新生肌管形成,抗肌萎缩蛋白免疫组化呈弱阳性,少数为强阳性反应,DNA分析:供者基因DNA占1%～13%;移植后126天抗肌萎缩蛋白免疫组化检测显示阳性的肌纤维明显增多,供者基因DNA上升至2.5%～25%;(6)患儿血清CK从移植治疗前的5735U/L降至274U/L;(7)术后100天体检发现患儿肌力略有改善,肢端温暖。结论异基因脐血干细胞移植治疗DMD,可在移植后短期内重建造血�
- 张成冯慧宇黄绍良方建培肖露露姚晓黎陈纯叶欣曾缨卢锡林文剑明张为西李中冯善伟徐宏贵黄科周敦华陈维谢有梅席静张萌黎阳刘颖
- 关键词：脐血干细胞移植假肥大型肌营养不良症抗肌萎缩蛋白造血功能
- 1053例中国DMD/BMD的临床表型和基因型分析
- 目的 Duchenne型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)和Becker型肌营养不良症(Becker muscular dystrophy,BMD)为等位基因病,DMD基因是导...
- 杨娟李少英刘焯霖李亚勤操基清冯善伟王艳云詹益鑫喻长顺陈菲利婧孙筱放张成
- 椎间盘突出患者椎间盘Fas基因的表达被引量：3
- 2013年
- 背景:临床中发现腰椎间盘突出症常在一个家族中多人甚至全部发病,而且发病的部位、原因、症状基本一致,这表明基因在该种病症中扮演着重要的角色。目的:分析家族性腰椎椎间盘突出症患者椎间盘内Fas凋亡基因表达的特点。方法:用半定量RT-PCR方法检测15例家族性腰椎椎间盘突出患者、21例普通椎间盘突出患者、5例新鲜尸体椎间盘的软骨终板和髓核组织中Fas基因的表达情况。结果与结论:家族性椎间盘突出与普通椎间盘突出患者终板内Fas基因的表达均高于新鲜尸体椎间盘终板内Fas基因的表达,差异有显著性意义(P<0.05),家族性椎间盘突出与普通椎间盘突出患者终板内Fas基因的表达差异无显著性意义(P>0.05)。家族性椎间盘突出患者髓核内Fas基因表达与普通椎间盘突出患者、新鲜尸体髓核内Fas基因表达相比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结果可见家族性椎间盘终板中Fas基因的表达增加可能是继发性的,可以通过阻止终板退变来达到阻止椎间盘退变的目的。
- 吕浩然杨进顺黄彦赵玉冯善伟
- 关键词：椎间盘椎间盘移位CD95逆转录聚合酶链反应
- 假肥大型肌营养不良症的基因型与临床表型关系分析被引量：9
- 2012年
- 目的分析中国人群假肥大型肌营养不良症基因型和临床表型之间的关系。方法临床诊断Duchenne型肌营养不良症（Duchenne muscular dystrophy，DMD）和Becker型肌营养不良症（Becker muscular dystrophy，BMD）患者，应用多重探针连接依赖性扩增技术进行DMD基因检测，将基因检测结果与临床诊断比较进行统计分析。结果280例DMD基因缺失或重复患者中，DMD患者238例（85．0％），BMD患者35例（12．5％），中间型患者7例（2．5％）。DMD或BMD符合阅读框原则的有252例，占92．31％（252／273），不符合阅读框的有21例，占7．69％（21／273）。DMD基因为整码突变而患者表现为DMD的有12例（12／273，4．40％），移码突变而患者表现为BMD的有9例（9／273，3．30％）。7例中间型患者均为移码突变。结论阅读框假说可以解释大约90％DMD或BMD基因型与表现型关系，部分移码突变患者表型为BMD可有助于了解该病的发病机制，为未来治疗提供理论依据。
- 冯善伟梁颖茵操基清宋新明张成
- 关键词：假肥大型肌营养不良症基因型表现型移码突变
- 1053例中国DMD/BMD的临床表型和基因型分析
- 背景 Duchenne型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)和Becker 型肌营养不良症(Becker muscular dystrophy,BMD)为等位基因病,DMD基因是...
- 杨娟李少英李亚勤操基清冯善伟王艳云詹益鑫喻长顺陈菲利婧孙筱放张成
- 骨髓干细胞移植后mdx鼠抗肌萎缩蛋白的表达被引量：3
- 2006年
- 目的 研究骨髓干细胞移植治疗Duehenne型肌营养不良鼠（mdx鼠）后抗肌萎缩蛋白表达的动态变化。方法 取6-8周龄C57 BL／6鼠骨髓干细胞，以2×10^7个／只干细胞尾静脉移植到经7Gy γ射线预处理后的7-9周龄mdx鼠体内，分别于移植后5、8、12、16周应用免疫荧光、逆转录聚-合酶链反应、Western blot检测腓肠肌抗肌萎缩蛋白的表达情况。结果 经γ射线放疗预处理的mdx鼠，在尾静脉移植骨髓干细胞5周后可见抗肌萎缩蛋白少量表达，随移植时间延长表达逐渐增多，16周时肌纤维抗肌萎缩蛋白的表达为12％，并可见肌细胞核中移现象较同龄mdx鼠对照组减少，边居增多。结论 同种异体骨髓干细胞移植治疗mdx鼠后，骨髓干细胞通过血液循环趋向病变肌组织，并分化为肌细胞表达抗肌萎缩蛋白。随移植时间延长表达增多，提示骨髓干细胞移植可长久持续参与受损骨骼肌的修复与再生。
- 冯善伟张成姚晓黎于美娟李经纶陈松林柳太云卢锡林
- 关键词：骨髓干细胞MDX鼠抗肌萎缩蛋白
- 格林巴利综合征合并类风湿性关节炎2例临床特征及治疗探讨被引量：1
- 2006年
- 卢锡林冯善伟姚晓黎于美娟张成
- 关键词：格林-巴利综合征
- HSV-1 VP22及microdystrophin基因融合表达重组质粒的构建及其生物学特性的初步研究
- 2009年
- 目的构建人单纯疱疹病毒1型（HSV-1）病毒蛋白22（VP22）及microdystrophin基因融合表达重组质粒，体外研究其表达及HSV-1 VP22介导的蛋白转导特性，为进一步利用此重组质粒治疗Duchenne型肌营养不良症（DMD）奠定基础。方法从质粒pSINrep5-VP22中PCR扩增HSV-1 VP22全长基因，然后克隆至真核表达载体pAVX1中，构建重组质粒pAVP22；再用NotⅠ酶切含microdystrophin基因的pBSK-MICRO质粒，获得microdystrophin基因，片段回收后定向插入质粒pAVP22中，获得重组质粒pAVP22-MICDYS；然后将重组质粒pAVP2-MICDYS转染至小鼠成纤维细胞3T3细胞，通过RT-PCR、Western blot及间接免疫荧光检测microdystrophin基因的转录及蛋白表达；最后收集转染后3T3细胞上清。感染人间充质干细胞（MSCs），检测重组蛋白在人MSCs中的表达情况来分析HSV-1 VP22是否可以介导VP22-microdystrophin融合蛋白的转导。结果成功构建了含有HSV-1 VP22和microdystrophin基因的重组质粒，并在体外得到了很好表达；同时也证实HSV-1 VP22提高了microdystrophin基因在3T3细胞中的表达效率。并可介导VP22-microdystrophin蛋白从3T3细胞到人MSCs间的转导。结论该重组质粒的构建及体外成功表达和蛋白转导特性的确定为下一步用该重组质粒进行DMD疾病治疗研究奠定了基础。
- 熊符张成陈松林郑卉肖少波潘永飞于美娟冯善伟卢锡林
- 关键词：蛋白转导
